pHyVec4-常用生化试剂-试剂-生物在线
pHyVec4

pHyVec4

商家询价

产品名称: pHyVec4

英文名称: pHyVec4

产品编号: EY-O900012

产品价格: 0

产品产地: 国产

品牌商标: 上海一研

更新时间: null

使用范围: null

上海一研生物科技有限公司
  • 联系人 :
  • 地址 : 上海闵行区沪闵路6269号
  • 邮编 :
  • 所在区域 : 上海
  • 电话 : 136****8337
  • 传真 : 021-59162051
  • 邮箱 : 3004994300@qq.com

 质粒名称:pHyVec4

质粒规格:2ug
 
实验步骤:
1)质粒提取
1.10,0001min离心收集1.5-5ml菌液沉淀于1.5ml离心管中
2.加入100溶液1,振荡至彻底悬浮
3.加入200溶液2,立即轻柔颠側离心管6次,使菌体充分裂解,随后将离心管冰上放置
3分钟
4.加入150山溶液3,立即温和颠倒离心管数次,冰上放置3分钟,10,00g离心10mins
5.将步骤4的上清转移至新的离心管(尽量去除杂质),加入等体积的苯酚/氖仿/异成醇混
合均匀10,000离心5min
将步骤5的上清转移至新的离心管,加入2倍体积的无水乙醇,室温放置5-1omin,沉
降DNA
7.10000g离心10分钟,弃乙醇,保留沉淀,加入1ml706的乙醇洗涤沉淀,10,000离
心5分钟
8.倒掉乙醇溶液,用吸水纸吸净管壁上的水珠,室温蒸发痕量乙醇
9.加入适量含 Rnase的TE或灭菌双蒸水溶解质粒DNA
2)质粒鉴定琼脂糖礙胶电泳
灌胶:胶中加入芡光染料〈 SYBR Green)
加样:质粒+上样緩冲液→混匀
电泳
结果观察:UV灯下
 
pHyVec4实验分析:
裂解细胞中除含有质粒DNA外,还含有基因组DNA、各种RNA、蛋白质和脂类等物质,因
用碱裂解法除去杂质
1、防止DNA裂解: Solution1
1)、所含糖增加溶洨黏度,維持渗透压,防止DNA受机械剪切作用降解
2)、所含EDTA抑制酶活性
2、溶解与变性: Solution2
1)强碱使质粒DNA和染色体DNA变性
100565-200701 美沙拉嗪 UV法释放 100mg
100566-200401 甲磺酸多沙唑嗪 含量测定 100mg
100567-200501 昔萘酸沙美特罗 含量测定 50mg
100568-200401 盐酸喹那普利 含量测定 100mg
100570-200401 利培酮 含量测定 100mg
100571-200601 来氟米特 含量测定 100mg
100572-200401 爱普列特 UV法含量测定 50mg
100573-201002 羟苯磺酸钙 UV法溶出度检查 100mg
100574-200401 尼索地平 HPLC法含量测定 100mg
100575-200903 泮托拉唑钠 含量测定 100mg
100578-200401 异烟肼 含量测定 50mg
100579-200401 聚乙烯醇 含量测定 100mg