2019-nCoV LAMP 荧光法核酸扩增试剂盒(LAMP荧光法)-生物分子-试剂-生物在线
2019-nCoV LAMP 荧光法核酸扩增试剂盒(LAMP荧光法)

2019-nCoV LAMP 荧光法核酸扩增试剂盒(LAMP荧光法)

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产品名称: 2019-nCoV LAMP 荧光法核酸扩增试剂盒(LAMP荧光法)

英文名称: 2019-nCoV LAMP 荧光法核酸扩增试剂盒(LAMP荧光法)

产品编号: HZ382536

产品价格: 0

产品产地: 中国/上海

品牌商标: 沪震生物

更新时间: 2023-08-17T10:24:20

使用范围: null

上海沪震实业有限公司
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 2019-nCoV LAMP 荧光法核酸扩增试剂盒(LAMP荧光法)

描述:该制品系专为 RNA 样本的 LAMP 扩增反应设计, 制品中 Bst 4.0+ Polymerase 中包含 Bst 2.0 DNA 聚合 酶、 极其耐热 ThermoStable V 转录酶、Rnase Inhibitor,在 RNA LAMP 扩增中无需再加入任何其它 酶制品即可用于 RNA LAMP 扩增。除此外,Bst4.0+ DNA Polymerase 聚合酶中不含有甘油成分,因此可用于 建立 LAMP 引物 mix 与酶制品的冻干品,以提高 LAMP 检测制品的稳定性和易用性。 Bst 4.0+ Polymerase 可搭配不同的反应 Buffer 从而 实现不同的显色与检测方式。三种Buffer均已包含dNTP Mg 2+和相应的反应缓冲盐。其中 2xRed LAMP BufferD 用于红黄变色反应,扩增完毕后阳性样品为黄色,阴性样 品为红色;2xSG LAMP BufferD 包含 SYBR Green 染料 用于实时荧光检测;2xLAMP BufferD 用于浊度分析、浊 度仪或搭配 OG 橙绿变色反应管(阳性样本为绿色、阴性 样本为橙黄色,A3821)。 A3825 Bst4.0+ Polymerase (250 μl) A3825-01 2xRed LAMP BufferD (1 ml) A3825-02 2xLAMP BufferD (1 ml) A3825-03 2xSG LAMP BufferD (1 ml) 注意:Bst4.0+ Polymerase2.5μl 该制品包含 8U Bst2.0 DNA Polymerase20U ThermoStable V反转录酶、8U Rnase Inhibitor22%海藻糖,不含甘油,可用于冻干。 储存:长期保存于-20,可保存 2 年。短期保存置于 4 保存 3 个月,避免反复冻融。 使用方法: 1. 配制反应体系 0.2ml EP 反应管中加入下述试剂 2xLAMP BufferD 10 μl Bst4.0+ Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer Mix 2 μl 模板 RNA X μl ddH2O 到总体积 20 μl 10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM LoopF/B 分别为 4 μMF3/B3 分别为 2 μM 2. 反应体系配好后,置于 60~68°C(首次实验采用 65°C 进行反应 20~45min 3. 引物及酶制品的冻干(可参考) Bst4.0+ DNA Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer 2 µl 45%海藻糖 0.5 μl Total 5 μl 将该制品进行冻干处理,获得冻干品。 4. 冻干制品的 LAMP 扩增 向一份冻干品中加入 10 μl 2x Red LAMP BufferD 溶解冻 干制品,并加入最多 10 μl 的检测 RNA 模板(总体积为 20 μL) 进行 LAMP 扩增。 

LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)是一种新型的滚环扩增技术,在恒温条件下,呈指数级别放大核酸分子,30分钟内将DNA放大109~1010倍。其快速、恒温的独特技术优势,使得LAMP技术成为开发诊断试剂的明星潜力技术。由于在LAMP扩增中用到很高浓度的引物,因此难免保证有少量错配和引物Dimer,这些轻微的污染都会导致LAMP高速的扩增中造成假阳性检测。依托独有的显色技术和阴性控制技术建立了全新的LAMP检测平台,包括RNA RT-LAMP Mix、DNA LAMP Mix、DNA Hot LAMP Mix,该系列试剂均可用于黄红变色、橙绿变色和荧光检测。
RNA RT-LAMP Mix系专为RNA样本的LAMP扩增反应设计,制品中Bst 4.0+ Polymerase中包含Bst 2.0 DNA聚合酶、极耐热 ThermoStable V反转录酶、Rnase Inhibitor,在RNA的LAMP扩增中无需再加入任何其它酶制品即可用于RNA的LAMP扩增。DNA LAMP Mix系专为DNA样本的LAMP扩增反应设计,制品中包含Bst 2.0 DNA聚合酶及海藻糖等,用于建立以DNA为模板的LAMP扩增;DNA Hot LAMP Mix中的Bst 7.0 DNA Polymerase为经重构架设计的Bst DNA聚合酶,其保留了Bst DNA聚合酶的链置换活性,并提高了其温度耐受性,该酶可以耐受85℃。这种短暂的高温耐热性能使得LAMP扩增更具有更高的灵敏度、免核酸提取等优势。该系列产品聚合酶中不含有甘油成分,因此可用于建立LAMP引物mix与酶制品的冻干品,以提高LAMP检测制品的稳定性和易用性。

主要特征

  • 快速检测:可在20~40min内完成检测。
  • 灵敏度高:在最优条件下可检测到单拷贝,稳定检测10拷贝。
  • 特异性高:六条特异性引物,保证了产物的特异性和检测的可靠性。
  • 操作简单:恒温检测。
  • 匹配便携式小型设备、可野外操作。

以2019-nCov核酸扩增为例比较三种方法的性能

  红黄变色可视化
(Cat.No.:A3825-16)
橙绿变色可视化
(Cat.No.:A3825-26)
荧光法
(Cat.No.:A3825-36)
试剂信息 试剂信息 靶标均为N基因,冻干Assay均相同。搭配不同Buffer实现不同的显色。 冻干品,可室温运输。 基础试剂均为RNA RT LAMP Mix (A3825)。
检测方法 肉眼观测 肉眼观测 SYBR Green荧光
检测设备 水浴锅、金属浴、PCR仪 水浴锅、金属浴、PCR仪 定量PCR或恒温荧光仪
阳性判读方式 黄色为阳性 绿色为阳性 有扩增曲线为阳性
反应温度 65℃ 65℃ S65℃
反应时间 30min 20min 15-18min
灵敏度(100%检出) 10 copies/test 10 copies/test 10 copies/test
单copy检出率 10-30% 30-50% 30-50%
假阳性比例 <1% <1% <1%
抗杂质能力 +++ +++++ +++++
操作通量 不适宜大量样本 可高通量检测 30-50%

实例展示

1、A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以2019-nCoV 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起始前,下图为 65 度反应 30min 后。
2、A3825-02 搭配 OG 橙绿变色反应管(A3821)(肉眼观察)
以2019-nCoV 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起始前,下图为 65 度反应 20min 后。
3、A3825-02 用于浊度检测(肉眼观察或采用浊度仪)
以2019-nCoV 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起始前,下图为 65 度反应 30min 后。
4、A3825-03 用于荧光检测(便携式恒温检测仪)
以2019-nCoV 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起始前,下图为 65 度反应 26min 后。

 

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!