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9N (exo-) DNA Polymerase

9N (exo-) DNA Polymerase

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产品名称: 9N (exo-) DNA Polymerase

英文名称: 9N (exo-) DNA Polymerase

产品编号: HZ1801A

产品价格: 0

产品产地: 中国/上海

品牌商标: 沪震生物

更新时间: 2023-08-17T10:24:20

使用范围: null

上海沪震实业有限公司
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 9N (exo-) DNA Polymerase

描述:该制品系专为 RNA 样本的 LAMP 扩增反应设计, 制品中 Bst 4.0+ Polymerase 中包含 Bst 2.0 DNA 聚合 酶、 极其耐热 ThermoStable V 转录酶、Rnase Inhibitor,在 RNA LAMP 扩增中无需再加入任何其它 酶制品即可用于 RNA LAMP 扩增。除此外,Bst4.0+ DNA Polymerase 聚合酶中不含有甘油成分,因此可用于 建立 LAMP 引物 mix 与酶制品的冻干品,以提高 LAMP 检测制品的稳定性和易用性。 Bst 4.0+ Polymerase 可搭配不同的反应 Buffer 从而 实现不同的显色与检测方式。三种Buffer均已包含dNTP Mg 2+和相应的反应缓冲盐。其中 2xRed LAMP BufferD 用于红黄变色反应,扩增完毕后阳性样品为黄色,阴性样 品为红色;2xSG LAMP BufferD 包含 SYBR Green 染料 用于实时荧光检测;2xLAMP BufferD 用于浊度分析、浊 度仪或搭配 OG 橙绿变色反应管(阳性样本为绿色、阴性 样本为橙黄色,A3821)。 A3825 Bst4.0+ Polymerase (250 μl) A3825-01 2xRed LAMP BufferD (1 ml) A3825-02 2xLAMP BufferD (1 ml) A3825-03 2xSG LAMP BufferD (1 ml) 注意:Bst4.0+ Polymerase2.5μl 该制品包含 8U Bst2.0 DNA Polymerase20U ThermoStable V反转录酶、8U Rnase Inhibitor22%海藻糖,不含甘油,可用于冻干。 储存:长期保存于-20,可保存 2 年。短期保存置于 4 保存 3 个月,避免反复冻融。 使用方法: 1. 配制反应体系 0.2ml EP 反应管中加入下述试剂 2xLAMP BufferD 10 μl Bst4.0+ Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer Mix 2 μl 模板 RNA X μl ddH2O 到总体积 20 μl 10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM LoopF/B 分别为 4 μMF3/B3 分别为 2 μM 2. 反应体系配好后,置于 60~68°C(首次实验采用 65°C 进行反应 20~45min 3. 引物及酶制品的冻干(可参考) Bst4.0+ DNA Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer 2 µl 45%海藻糖 0.5 μl Total 5 μl 将该制品进行冻干处理,获得冻干品。 4. 冻干制品的 LAMP 扩增 向一份冻干品中加入 10 μl 2x Red LAMP BufferD 溶解冻 干制品,并加入最多 10 μl 的检测 RNA 模板(总体积为 20 μL) 进行 LAMP 扩增。 

9N (exo-) DNA Polymerase 是9N DNA聚合酶中的突变体,具有较强的掺入修饰底物的能力,如:ddNTP、rNTP 和acyNTP,因此其适用于核糖核酸置换法DNA测序、ddNTP或acyNTP的链终止法测序或SNP分析。该酶来源于E. coli菌株,此菌株含有从Thermococcus species 9°N-7 中克隆的经过基因工程改造的9°N (D141A/E143A/A485L) DNA聚合酶基因。

主要特征和应用

  • 提高了修饰核苷酸的掺入能力
  • 部分核糖核酸置换法测定 DNA 序列
  • ddNTP 或 acyNTP 的链终止法用于测序或 SNP 分析

组分

组分名称 数量
9N (exo-) DNA Polymerase (2 U/μl) 50 μl/500 μl
10×HG PCR Buffer 6 1 ml/5 ml

单位定义

一个活力单位即在在74°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

储存

-20℃可保存3年。

使用方法

按下表配制反应液:
9N (exo-) DNA Polymerase (2 U/μl)                 1 μl
10×HG PCR Buffer 6                                         5 μl
dNTP Mixture (2.5 mM each)                            2 μl
模板DNA                                               1 ng~1 μg
Primers(10 μM)                                   0.25~1 μl
ddH2O                                                 Up to 50 μl
PCR扩增循环参数 
循环数 温度 时间
1st Cycle 95°C 2min
25-35 Cycles 95°C 20s
Tm 20s
72°C 0.5kb/min
Last Cycle 72°C 2min

 

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!