猪蓝耳病毒检测试剂盒(实时荧光PCR法)-PCR/RT-PCR/qPCR-试剂-生物在线
猪蓝耳病毒检测试剂盒(实时荧光PCR法)

猪蓝耳病毒检测试剂盒(实时荧光PCR法)

商家询价

产品名称: 猪蓝耳病毒检测试剂盒(实时荧光PCR法)

英文名称: Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)

产品编号: YS310204

产品价格: 0

产品产地: 上海

品牌商标: 雅吉

更新时间: null

使用范围: null

上海雅吉生物科技有限公司
  • 联系人 :
  • 地址 : 上海市闵行区元江路5500号第1幢5658室
  • 邮编 :
  • 所在区域 : 上海
  • 电话 : 158****3937
  • 传真 : 021-34661275
  • 邮箱 : yajikit@163.com

【产品名称】

通用名蓝耳病毒检测试剂盒(实时荧光PCR法)

英文名称 Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)

【包装规格】25T/& 50T/

【预期用途】

本试剂盒利用实时荧光PCR原理,定性检测猪蓝耳病病毒,对猪蓝耳病病毒诊断及疗效评估有重要指导意义。

【检验原理】

本试剂盒针对猪蓝耳病毒的高度保守区域设计特异性引物和探针,在反应体系中含猪蓝耳病毒基因组模板的情况下,PCR反应得以进行并释放荧光信号。利用荧光定量PCR仪对PCR过程中相应通道信号进行实时监测和输出,实现检测结果的定性分析。

【主要组成成份】

 

组成

50T/

1

PRRSV RT-PCR反应液

750 μL×1

2

PRRSV逆转录酶

100 μL×1

3

PRRSV Taq

150 μL×1

4

PRRSV阳性对照

 40 μL×1

5

PRRSV阴性对照

 40 μL×1

6

说明书

1

注:阴性对照为猪基因组DNA,阳性对照为失去活性的猪蓝耳cDNA

【储存条件及有效期】避光-20以下保存,避免反复冻融,有效期12个月。

【适用仪器】ABI 系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480Cepheid SmartCyclerRotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道实时荧光定量PCR仪。

【样本要求】

1.血液或血清样品:使用无菌注射液抽取样品置于离心管中待检。

2.肺脏、淋巴结和脾脏样品:取样本20 g,加少量灭菌PBS,用无菌研磨器研磨至糊状,再用4倍体积的PBS稀释成乳剂,8000 rpm 4离心10 min,取上清待检。

3.应避免标本间交叉污染。

4.样本收集后可立即检测;若不能立即检测,可置于28冷藏过夜保存;如需长期保存,标本应冻存于-80以下,避免反复冻融。

【检验方法】

1. 试剂准备(试剂准备区)

1)从冰箱中取出试剂盒, 从试剂盒中取出实验所需试剂充分融化混匀并瞬时离心以去除管壁附着液体。

2)核算当次实验所需要的反应数(n),并根据如下表所示反应体系计算当次实验所需要的各种试剂量。

n =阴性对照数(1T+阳性对照数(1T+误差预留量(1T+样本数

单反液配制表(每份)

RT-PCR反应液

15.0 μL

逆转录酶

 2.0 μL

Taq

 3.0 μL

 (3)在无菌离心管中加入上述试剂,充分混匀后瞬时离心。按照20μL/管分装量将试剂分装至PCR反应管。

2.样本准备(样本处理区)

QIAGENRoche公司RNA提取试剂盒提取RNA,具体操作按照其试剂盒说明书操作。

3.加样

在上述制备好的PCR反应样本管中分别加入处理好的待测标本RNA5 μL、终体积25 μL/管,盖好PCR反应盖混匀后瞬时低速离心,转移到PCR仪器上。阴性对照和阳性对照管则各加5 μL试剂盒自带的阴性对照或阳性对照品,终体积为25 μL/管,盖好PCR反应盖混匀后瞬时低速离心,转移到PCR仪器上。

4.PCRPCR扩增区)

1)取样本处理区准备好的PCR反应管,放置在实时荧光定量PCR仪样品槽相应位置,并记录放置顺序。

2)按下表设置仪器核酸扩增相关参数进行PCR扩增。


 

 

 

 

 

 

 

 

反应体积

25μL

通道选择

FAM通道采集猪蓝耳病毒信号

PCR

反应

条件

步骤

条件

循环数

反转录

 4210分钟(min

1

预变性

953分钟(min

1

预扩增

955秒(s

TUNEology 波长可调检测卡盒-->