乙型肝炎病毒 cccDNA 荧光定量试剂盒
产品名称: 乙型肝炎病毒 cccDNA 荧光定量试剂盒
英文名称: HBV cccDNA qPCR Kit
产品编号: Z10000
产品价格: 0
产品产地: 中国
品牌商标: 雅吉生物
更新时间: null
使用范围: null
- 联系人 :
- 地址 : 上海市闵行区元江路5500号第1幢5658室
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- 所在区域 : 上海
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乙型肝炎病毒 cccDNA 荧光定量试剂盒共价闭合环状 DNA(covalently closed circularDNA,cccDNA) |
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是乙肝病毒前基因组 RNA 复制的原始模板,虽含量较少,每个肝细胞内只有约 |
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5~50 个拷贝,但对乙肝病毒的复制以及感染状态的建立具有十分重要的意义, |
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只有清除了 cccDNA,才能彻底消除乙肝患者病毒携带状态。因此 cccDNA 的 |
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检测具有重要的临床意义,本产品即是乙肝病毒 cccDNA 快速检测试剂盒。它 |
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具有下列特点: |
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1. 即开即用,用户只需要提供病毒 DNA 模板。 |
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2. 引物经过优化,特异性高。 |
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3. 荧光定量 PCR 检测,qPCR Mix 所含 SYBR Green I 只与双链 DNA 结合, |
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反应特异性强。 |
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4. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
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低温运输,-20℃保存,保存期限一年
一、样品 DNA 和引物的制备
用自选方法提取 HBV cccDNA。注意:病毒 DNA 纯化方法是决定检测灵 敏度的关键因素。如果不能很好纯化 HBV DNA,后面的 PCR 再灵敏也不 能提高整体检测灵敏度 。 在 引物管中加适量的 水使 引物 的 终浓度 为 10pmol/uL,即 10uM。
二、PCR 检测(30 μL 体系) 1. 在 PCR 管中加入下列成
自备 cccDNA 模板 |
1-5 μL |
无 |
无 |
HBV cccDNA 阳性对照 |
无 |
2 μL |
无 |
引物 14-10000f,10uM |
1 μL |
1 μL |
1 μL |
引物 14-10000r,10uM |
1 μL |
1 μL |
1 μL |
补水到 |
30 μL |
注:1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳 性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和 成分。最好在专门的区域操作。
2. 建议 PCR 反应参数(具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化)
过程 |
温度 |
时间 |
预变性 |
95℃ |
10 min |
PCR 反应 (45 个循环) |
95℃ |
10 s |
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52℃ |
16 s |
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72℃ |
10 s |