1．包装清单：

2．保存条件：本品置于-20℃保存，有效期1年。冷冻保存后出现微量沉淀为正常现象，不影响效果。

3．产品简介：

FrdbioRAutoExp是Frdbio公司推出的新型蛋白诱导表达培养基组分。大肠杆菌表达菌株在含AutoExp的培养基中生长到对数后期能够开始自行大量表达目的蛋白。与传统的IPTG诱导相比，使用AutoExp进行蛋白诱导具有以下优势：1）表达量高，是传统IPTG法诱导量的数倍；2）操作简单，省却了对菌体浓度、IPTG用量及诱导时间的优化；3）重复性好，不同批次的蛋白诱导情况稳定。

4．适用范围

能用IPTG诱导蛋白表达的大肠杆菌菌株。

5．使用方法

l  将表达质粒转化表达宿主，挑取转化子于含有相应抗生素的2 ml 含0.8% LB液体培养基中活化培养。活化培养基中添加葡萄糖可防止蛋白渗漏表达并造成细胞毒性。

l  在每个含50 ml LB培养基的三角瓶中（容积为250 ml）加入2 ml AutoExp，并添加合适浓度的抗生素。

l  向三角瓶中接种0.2 ml新鲜活化的菌液。

l  将三角瓶用干燥滤纸片封口，置于37 ℃恒温摇床培养，转速设为200 rpm。

l  培养菌体至饱和（约12-15小时）后收集细胞，随即进行细胞破碎和蛋白纯化。

6．注意事项

l  不要在培养基中添加额外成分，也不要改变菌体生长温度、缩短菌体生长时间，否则目的蛋白可能无法被正常诱导。

l  为达到最大的蛋白诱导量，培养过程中应使培养液具有足够的通气量，因此三角瓶中培养基的量不可过多，瓶口应用通气性良好的滤纸封闭，且培养时摇床的转速不可过低。

l  许多情况下50 ml经AutoExp诱导的菌液可表达高至5~20 mg的目的蛋白。但对于少数毒性蛋白，AutoExp的诱导量会较低。

l  平均而言，AutoExp诱导与IPTG诱导得到的蛋白在可溶性方面相当。

7．附注

l  LB培养基配制方法：称取10 g tryptone，5 g yeast extract，5 g NaCl，加水溶解，定容至1 L，然后按每瓶50 ml分装至容积为250 ml的三角瓶中，置于121℃灭菌30 min。

*本试剂仅供实验室研究使用