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细菌基因组DNA提取试剂盒(磁珠法)北京索莱宝科技有限公司

金牌供应商

性能参数

产品名称: 细菌基因组DNA提取试剂盒(磁珠法)
产品货号: DM1600-50T
产品规格: 50T
产品产地: 中国 北京索莱宝
产品商标: solarbio
价    格: 询价元
保存与运输: 室温
现货状态: 咨询
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2022/3/21 9:03:00
浏览人数:359
诚信指数:15035点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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北京索莱宝科技有限公司
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北京市通州区马驹桥镇联东U谷景盛南四街15号85A三层
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产品详细描述

 细菌基因组 DNA 提取试剂盒(磁珠法)
货号:DM1600
规格:50T/100T
保存:室温干燥保存,复检期为 12 个月。2℃-8℃保存时间更长。磁珠置于 2℃-8℃保存(不能冷冻),收到货
后将蛋白酶 K 和 RNase A 放置 -20℃保存。
试剂盒内容: 

 产品简介:磁珠法提细菌基因组 DNA 剂盒,使细菌在裂解液中裂解完全后,在结合液的作用下促进基因组 DNA
与磁珠特异性地识别和高效的结合,经漂洗液漂洗后可最大限度去除杂质蛋白及其它有机化合物,在外加磁场力
的作用下能从样品中分离出 DNA。提取的基因组 DNA 纯度高 A260/A280比率介于 1.8-2.0 之间,可以应用到各类分
子生物学下游实验。适用于革兰氏阴性菌。 

优势:磁珠法提取细菌基因组 DNA 具有传统柱式法无法比拟的优势。与柱式法相比大大缩短了实验时间且提取
到高质量的细菌基因组 DNA 可以应用到各类分子生物学下游实验。具有操作简单,用时短,安全无毒,可完成
自动化提取等优势。 

操作步骤: 使用前请先在漂洗液加入异丙醇/无水乙醇,加入试剂体积请参照瓶体上的标签。 蛋白酶 K 溶液配置:取 1mL 溶酶液加入到 20mg 蛋白酶 K 粉末中,配成 20mg/mL 的蛋白酶 K 溶液,配好的蛋白酶溶液-20℃保 存。
1. 于 EP 管中加入菌液 1-3mL,12000 rpm 离心 1 min,尽量吸除上清。
2. 向菌体中加入 200 μL 裂解液,涡旋震荡或用移液枪反复吹吸菌体,使菌体充分悬浮。加 入 2-5 μL 蛋白酶 K, 充
分颠倒混匀,于 60℃水浴锅中消化 10-20 min,菌液呈现清亮粘稠即消化完全。
3. 将 EP 管从水浴锅中取出,待温度降至室温后加入 4μL RNase A,移液枪吹吸混匀,室温静置 15min。
4. 加入等体积结合液,用移液枪吹吸混匀,于 60℃水浴锅中水浴 10 min。
5. 将 EP 管从水浴锅中取出,待温度降至室温后加入 20 μL 磁珠,涡旋震荡混匀,室温静置 10 min。将 EP 管置
于磁力架中进行磁分离,待磁珠完全吸附于磁力架后,用移液枪沿管壁尽量将液体吸除干净,注意不要吸到磁珠。
6. 加入 500 μL 的漂洗液 1(使用前加入异丙醇),用涡旋振荡器震荡混匀。将离心管放置于磁力架中,待磁珠完
全吸附于磁力架后,用移液枪沿管壁尽量将液体吸除干净,注意不要吸到磁珠。
7. 重复第 6 步操作。
8. 加入 500 μL 的漂洗液 2(加无水乙醇后使用),用涡旋振荡器震荡混匀。将离心管放置于磁力架中,待磁珠完
全吸附于磁力架后,用移液枪沿管壁尽量将液体吸除干净,注意不要吸到磁珠。
9. 打开离心管的盖子,于室温中静置干燥 5 分钟,观察离心管壁和底部液体挥发完全且磁珠表面呈光滑的亮面即
可,注意干燥时间不能太久,会使得磁珠不易被洗脱。
10. 加洗脱液 50-100 μL,涡旋混匀,56℃孵育 5 min 后将离心管置于磁力架中,待磁珠完全吸附于磁力架后,用
移液枪沿管壁将溶液吸到新的离心管中,注意不要吸到磁珠,所得溶液即为纯化后的基因组 DNA 样品,放于-20℃
保存。 

注意事项:
1. 磁珠使用前用涡旋震荡器震荡混匀。
2. 磁珠置于 4℃冰箱保存。
3. 冷冻,干燥和离心等操作会引起磁珠团聚,不易于重悬和分散,并影响磁珠 表面功能基团的化学活性。
4. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取量下降。 

实验展示:
3mL 大肠杆菌菌液提取基因组(磁珠法)

 

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