酵母双杂交/酵母单杂交/文库构建/文库筛选武汉金开瑞生物工程有限公司

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技术服务信息

服务名称:酵母双杂交/酵母单杂交/文库构建/文库筛选
服务类别:分子生物学服务 - 基因合成服务
价格:询价
允许参观:协商决定
所在区域:湖北.武汉
更新时间:2019/4/3 9:37:00
浏览人数:1341
诚信指数:522点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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武汉金开瑞生物工程有限公司
地址:
武汉市东湖高新区高新大道666号生物城创新园B4栋2楼
邮编:
430206
电话:
027-62431110
传真:
027-88189683
联系人:
王洁雅
所在区域:
湖北·武汉
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技术服务详细描述

酵母单杂交
酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸-蛋白相互作用的工具,被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控,如鉴别DNA结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析DNA结合结构域信息等。
酵母双杂交
 
 
 

酵母双杂交系统已发展成为鉴定和检测蛋白质相互作用的一种标准方法,在蛋白质相互作用关系的研究中扮演着非常重要角色。

 

核蛋白酵母双杂交:
 
 
 

核蛋白酵母双杂交技术最初由Fields等人在研究酵母转录因子GAL4性质时建立,后续经过不断改进已发展成为一种成熟的蛋白-蛋白互作研究工具,具有简便、灵敏、可反映蛋白在活细胞内互作真实情况的特点,被广泛应用于互作蛋白的筛选、蛋白相互作用的鉴定/验证、蛋白互作机理的探究、蛋白连锁图谱绘制等工作。

 

膜蛋白酵母双杂交:
UALmembrane技术在传统的酵母双杂交系统的基础上,巧妙地利用分离的泛素系统(split-ubiquitin)进行蛋白质相互作用的筛选;泛素作为降解信号分子,人为分成两部分:N端(Nub),C端(Cub),互补重构的完整泛素分子可被泛素专一性蛋白酶(UBPs)识别,从而导致与泛素相连的蛋白被酶解。

技术应用

酵母双杂交系统因其具有灵敏性高,功能强大,适应范围广等特点,现已被广泛应用于多个研究领域:
1、将已知基因作为诱饵,在选定的cDNA文库中筛选与诱饵蛋白相互作用的蛋白;
2、一对已知蛋白相互作用研究;
3、蛋白相互作用结构域和位点的研究;
4、建立基因组蛋白连锁图。

服务优势
采用Clontech SMART专利技术,以总RNA为模板,用SMART方法反转录成cDNA,材料用量少,获得全长的比例高。

服务流程

酵母单/双杂交文库构建

接受订单及样本→总RNA提取→反转录→双链cDNA→酵母感受态细胞→转化→文库效价测定→成果交付

酵母单杂交文库筛选

接收订单及样品—诱饵载体及诱饵菌株构建—自激活检测—克隆数计数—阳性克隆菌株鉴定—结果交付

酵母双杂交文库筛选

接受订单及样本→构建诱饵载体→毒性检测→测定杂交效率→鉴定阳性克隆菌株→成果交付

服务内容及说明

酵母单杂交

服务项目

客户提供

最终交付

文库构建

组织/细胞

滴度在1×108cfu/mL以上的酵母文库菌液;文库PCR鉴定结果图片(阳性率在80%左右)

文库筛选

promoter基因序列/质粒

筛选过程中的全部原始图片;筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果

 针对酵母单杂交实验结果,可作进一步验证:

 

服务内容

实验目的

细分

周期(工作日)

EMSA

验证启动子和蛋白互作

探针合成及标记

10

EMSA实验

20

双萤光素梅检测

验证启动子和蛋白互作

载体构建

10-15

双萤光素酶检测

25

注:1. 双萤光素酶检测默认使用293T细胞,使用其他细胞视培养及转染难度议价;
2. 双萤光素酶检测启动子-转录因子验证默认1个转录因子 + 启动子序列WTMut1个;microRNA靶基因验证默认1microRNA + 靶序列WTMut1个,超过以上组合数量请询价。

酵母双杂交

服务项目

客户提供

最终交付

文库构建

组织/细胞

滴度在1×108以上的酵母文库菌液;文库PCR鉴定结果图片(阳性率在90%左右)

文库筛选

蛋白序列/基因序列/质粒

筛选过程中的全部原始图片;筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果

针对酵母双杂交实验结果,可作进一步验证:

 

服务内容

实验目的

细分

周期(工作日)

Co-IP

验证蛋白互做

/

20

GST pull-down

验证蛋白互做

GST pull-down+WB/银染

20   

服务链接:http://www.genecreate.cn/yeast_two-hybrid/

关于金开瑞:
武汉金开瑞生物工程有限公司是一家专业为全球各大制药公司、科研诊断试剂公司、各大高校/科研院所以及大型医院的临床科室提供生物相关技术服务的一站式供应商。优势服务项目包括有基因合成、载体构建、蛋白质组学服务、病毒包装、蛋白表达、抗体制备等。更多详见http://www.genecreate.cn/

武汉金开瑞生物工程有限公司

地址:武汉市东湖高新区高新大道666号生物城创新园B42
电话:027-88189683
邮编:430206
 
 

 

 

 

 

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