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蛋白质定性鉴定

蛋白质定性鉴定

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产品名称: 蛋白质定性鉴定

英文名称: MALDI-TOF/TOF;HPLC-MS/MS

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产品价格: 500

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北京昂立信生物科技有限公司
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MALDI-TOF/TOF蛋白质鉴定

技术原理

MALDI-TOF/TOF,即基质辅助激光解析电离飞行时间质谱,是将样品均匀包埋在基质中,基质吸收激光提供的能量而蒸发,携带样品分子进入气相,并将一部分能量传递给样品分子使其离子化。TOF的原理是离子在电场作用下加速飞过飞行管道,根据到达检测器的飞行时间不同而被检测,即测定离子的质荷比(M/Z)与离子的飞行时间成正比,从而检测离子。适用于二维电泳或DIGE胶点样本或者较纯的蛋白样品的鉴定。


样本要求

样本类型

样本要求

双向凝胶电泳点

考染、银染(质谱兼容)点清晰可见

 

SDS-PAGE条带

单一蛋白质,纯度>90%,考染、银染(质谱兼容)清晰可见

 

蛋白质溶液

单一蛋白质,纯度>90%,蛋白质总量>5μg,浓度>0.1μg/μl

 

缓冲液不含去污剂NP40、Triton   X-100等

 

检测仪器

4800 Plus MALDI TOF/TOF™ABI

二、HPLC-MS/MS蛋白质鉴定

技术原理

HPLC-MS/MS,又叫高效液相色谱-质谱联用技术,通过液相色谱分离,串联质谱检测,最后用相应的数据库进行检索匹配。适用于二维电泳胶点、SDS-PAGE胶条、IP/Co-IP/pull-down产物以及shotgun混合蛋白质样品的蛋白鉴定。

样本要求

样本类型

样本要求

双向凝胶电泳点

考染、银染(质谱兼容)点清晰可见

SDS-PAGE条带

考染、银染(质谱兼容)条带清晰可见

蛋白质溶液

蛋白质总量>5μg,浓度>0.1μg/μl;缓冲液不含去污剂NP40Triton X-100

缓冲液不含去污剂NP40、Triton   X-100等

检测仪器

Thermo Scientific LTQ

Thermo Scientific Q Exactive

 

实验流


代表性文献

1. Wang X, et al. A comprehensive differential proteomic study of nitrate deprivation in Arabidopsis reveals complex regulatory networks of plant nitrogen responses. J Proteome Res, 2012; 11(4): 2301-2315.

2. Tamura K, et al. Identification and characterization of nuclear pore complex components in Arabidopsis thaliana. Plant Cell, 2010; 22(12): 4084-4097.