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TMT定量磷酸化

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产品名称: TMT定量磷酸化

英文名称: Quantitative phosphoproteomics (TMT)

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上海康成生物工程有限公司
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    蛋白质phosphorylation是一种重要的翻译后修饰(PTM),它动态可逆的调控细胞中几乎任意一个生物学过程。phosphorylation信号通路的失调是癌症等诸多疾病的标志性事件,同时蛋白激酶也是许多药物的主要作用靶点,因此具有极大的研究价值。伴随着基于质谱的蛋白质组学技术和phosphorylation多肽富集方法以及高通量定量技术的不断发展,phosphorylation蛋白组学已经成为目前最为成熟的PTM研究方向。TiO2 对phosphorylation多肽具有很高的特异性,广泛运用于丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸(pSTY)的phosphorylation富集研究;酪氨酸phosphorylation(pY)丰度往往较低,TiO2富集后也较难检测,通常需要采用特异性抗体进行富集,或与TiO2 串联富集。结合phosphorylation富集技术的高效性与质谱技术的高通量,深入研究在各种生理病理条件下phosphorylation蛋白组动态变化过程变得实际可行且意义重大。

图1. 定量phosphorylation蛋白组技术原理和phosphorylation信号调控的多种生物学过程。

    康成生物提供标准的定量phosphorylation蛋白质组学一站式服务,您只需提供保存完好的生物样品,康成专业的技术服务团队为您完成从样品制备到数据分析全部过程,并且提供完整的分析报告。如果酪氨酸phosphorylation是您的重点关注对象,我们还将提供pY深度富集和分析服务。

样本要求

样品类型

样品要求*

蛋白质提取物

浓度 >1μg/μl,蛋白质总量 >2mg

细胞样品

细胞量 >1×107

组织样品

动物、微生物组织湿重 >100mg

注:*酪氨酸phosphorylation需要更多的蛋白样品,详情请咨询康成生物技术人员。

实验流程


案例展示
 
    为了研究吸烟与胰腺疾病间的生物化学机制,来自Harvard Medical School的科学家使用了两种 nicotinic acetylcholine receptor (nAChR) 配体:nicotine  α-bungarotoxin 刺激 pancreatic stellate 细胞,并运用TMTphosphorylation蛋白组学技术, 高通量分析phosphorylation蛋白组变化。

     
    最终,发现了~16,000phosphorylation位点,其中nicotineα-bungarotoxin组分别有132个和451个位点相对于对照组具有显著差异,许多发生显著改变的phosphorylation位点与细胞核功能及转录事件有关。
 
 
 
 
 
 
 

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