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非标定量磷酸化

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产品名称: 非标定量磷酸化

英文名称: Quantitative phosphoproteomics (Label-free)

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上海康成生物工程有限公司
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      蛋白质phosphorylation是一种重要的翻译后修饰(PTM),它动态可逆的调控细胞中几乎任意一个生物学过程。phosphorylation信号通路的失调是癌症等诸多疾病的标志性事件,同时蛋白激酶也是许多药物的主要作用靶点,因此具有极大的研究价值。伴随着基于质谱的蛋白质组学技术和phosphorylation多肽富集方法以及高通量定量技术的不断发展,phosphorylation蛋白组学已经成为目前最为成熟的PTM研究方向。TiO2 phosphorylation多肽具有很高的特异性,广泛运用于丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸(pSTY)的phosphorylation富集研究;酪氨酸phosphorylationpY)丰度往往较低,TiO2富集后也较难检测,通常需要采用特异性抗体进行富集,或与TiO2 串联富集。结合phosphorylation富集技术的高效性与质谱技术的高通量,深入研究在各种生理病理条件下phosphorylation蛋白组动态变化过程变得实际可行且意义重大。

1. 定量phosphorylation蛋白组技术原理和phosphorylation信号调控的多种生物学过程

      康成生物提供标准的定量phosphorylation蛋白质组学一站式服务,您只需提供保存完好的生物样品,康成专业的技术服务团队为您完成从样品制备到数据分析全部过程,并且提供完整的分析报告。如果酪氨酸phosphorylation是您的重点关注对象,我们还将提供pY深度富集和分析服务。

样品要求

样品类型

样品要求

蛋白质提取物

浓度 >1μg/μl,蛋白质总量 >4mg

细胞样品

细胞量 >2×107

组织样品

动物、微生物组织湿重 >100mg

注:酪氨酸phosphorylation需要更多的蛋白样品,详情请咨询康成生物技术人员。

实验流程


非标定量

 

案例展示
      运用高通量label-free定量phosphorylation蛋白组学技术分析极短时间(30s)和中等时间(10min)段内胰岛素刺激对蛋白phosphorylation水平的影响,据此来研究早期胰岛素信号传递过程和动态调控关系
      运用高通量phosphorylation蛋白组学技术研究胰岛素在0-30s以及0-10min时间段内蛋白phosphorylation水平变化趋势(a)。对时间分辨的phosphorylation蛋白组数据进行聚类分析,能够发现胰岛素信号通路中的功能相关节点,粗体显示节点中的新成员(b)。

 

      根据蛋白phosphorylation水平变化模式,发现新的生物学现象:(a)两个相距很近的phosphorylation位点具有截然不同的phosphorylation模式,意味着不同的调控模式。(b)研究信号通路间的cross-talk。由Frs2介导的INSR通路与FGFR通路间的cross-talk

 

 

 

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