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变态反应性脑脊髓炎(AE)小鼠模型

变态反应性脑脊髓炎(AE)小鼠模型

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产品名称: 变态反应性脑脊髓炎(AE)小鼠模型

英文名称: Mouse Model for Allergic Encephalomyelitis (AE)

产品编号: DSI694Mu01

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武汉云克隆诊断试剂研究所
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来源
注射MOG35~55肽段免疫小鼠导致实验性自身免疫性脑脊髓炎
模式动物品系
SPF级C57BL/6 小鼠,健康,雄性,4~6W,体重为18g~20g。
实验分组
实验分六组:正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
实验周期
4-6 weeks
建模方法
多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是中枢神经系统炎性脱髓鞘性疾病,具有复发、迁延、致残率高等特点。由于MS标本不易获取,限制了对该疾病的研究,因此建立相应的动物模型是研究MS病理过程、发病机制的重要途径。

模型诱导EAE组小鼠:将抗原髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)多肽稀释成300ug/50ul,按1:1加入等量完全弗氏佐剂,并将结核杆菌含量补充至5mg/ml混合,充分乳化后按每只100ul于小鼠腋窝皮下注射。免疫当天及24h后经小鼠尾静脉注射100ul含200ng百日咳毒素的PBS。PBS对照组则用PBS代替抗原,余同EAE组小鼠的诱导。
应用
用于药物对自身免疫性脑脊髓炎小鼠损伤的治疗作用及其免疫学机制
模型评价
1.神经功能评分:
自免疫诱导当日起开始测量小鼠的体重,免疫后32天,采用双盲法进行神经功能评分,具体评分标准如下:
0级,无临床表现;
1级,精神委靡,尾部无力;
2级,行走步态异常,双后肢无力;
3级,双后肢瘫痪;
4级,双后肢瘫痪伴一侧或者两侧前肢瘫痪;
5级,濒死或者死亡。复发的定义是指在首次发病恢复后再次发作的临床评分高于以前,或者同一评分持续3d以上。


2.临床表现
小鼠在诱导12±3d急性起病,并在16±2d内达到高峰,持续时间不等,之后逐渐恢复至尾部轻度无力或者僵硬,小鼠发病的严重度评分为3.2±0.6分。

组织病理学
组织取材与病理学分析在EAE模型发病的高峰期,将小鼠经水合氯醛腹腔注射麻醉后,取其脑和脊髓,置于4%的多聚甲醛中固定,石蜡包埋切片,HE和固绿染色观察。
脑和脊髓实质中均有炎性细胞浸润,但病变分布以脊髓颈腰膨大为主,表现为大量淋巴细胞和中性粒细胞浸润,浸润沿包膜和小血管由外向内延伸,小血管周围可见血管套形成。固绿染色可见在炎症浸润区域,脊髓白质中有大小不等的片状髓鞘脱失区,髓鞘纤维疏松,大量空泡形成。PBS对照组和正常对照组小鼠脑和脊髓均未见明显异常改变。

统计学分析
应用SPSS软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x ±s)表示,采用t检验,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示有显