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肾缺血再灌注损伤(RIRI)大鼠模型

肾缺血再灌注损伤(RIRI)大鼠模型

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产品名称: 肾缺血再灌注损伤(RIRI)大鼠模型

英文名称: Rat Model for Renal Ischemia-Reperfusion Injury (RIRI)

产品编号: DSI529Ra01

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武汉云克隆诊断试剂研究所
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来源
缺血再灌注,双侧肾动脉夹闭法
模式动物品系
SD大鼠,SPF级,雄性,体重 220g~250g
实验分组
随机分组:对照组,模型组,阳性药物组,受试药物组,15只每组
实验周期
24h or 72h
建模方法
1. 选取250g左右大鼠,术前禁食12h,自由饮水。
2. 15%水合氯醛(350mg/kg)腹腔注射麻醉,大鼠背部去毛,消毒备皮。
3. 在背部脊椎旁1cm、肋骨下缘1cm处剪开皮肤及肌肉,可见到肾脏, 小心分离出两侧肾脏的肾动脉,迅速用动脉夹夹闭两侧肾动脉。
4. 缺血60min后松开动脉夹,恢复血流,观察肾脏恢复情况。
5. 分两层缝合开口,待大鼠清醒后,将其放回洁净笼具后放回饲养室饲养,定期观察大鼠状态及死亡情况并做好记录。
6. 对照组不做缺血处理,其他操作相同。
7. 分别取再灌注0h、3h、6h、12h、24h、72h六个时间点取材。麻醉大鼠,下腔静脉取血,室温静置2h后于4℃3000r离心10分钟提取血清,放入-80冰箱冻存。同时取左肾组织留作病理标本,右肾组织分生标本。
应用
疾病模型
模型评价
1. 血清生化指标检测:
取各时间点(0h、1h、3h、6h、12h、24h、72h)血清,检测血清BUN(尿素氮)和Scr(血肌酐)水平,评估肾功能。
2. 肾系数检测
摘取双侧肾脏后,生理盐水冲洗,称重计算肾系数。
肾系数=双侧肾重(mg)/体重(g)
3. 肾小管坏死的评分
每张切片×200 倍镜下取外髓质部 10 个视野,按 0 = 正常,1 = 轻微损伤(受损肾小管< 5%) ,2= 轻度损伤(受损肾小管 5 %~25 %) ,3 = 中度损伤(受损肾小管 25 %~75 %) ,4 = 重度损伤(受损肾小管> 75 %) 作半定量分析并计算其均值,作为肾小管坏死的评分指数

组织病理学
4%多聚甲醛溶液固定48h。常规组织脱水、透明、浸蜡 、包埋。石蜡切片进行HE染色和PAS染色。
对照组大鼠肾小球、 肾小管及肾间质结构基本正常。在模型组,随着再灌注时间的延长呈现不同程度的肾脏病理改变,可见肾小管上皮细胞浑浊肿胀,出现水样或空泡变性,刷状缘消失,部分肾小管上皮细胞凝固性坏死、脱落,腔内可见管型,并可见间质水肿,间质内灶性炎症细胞浸润,肾小球病变不明显。

标志因子水平
ELISA 法检测血清 TNF-α、IL-6 含量, 模型组大鼠血清 TNF- α 和 IL-6 含量在各时间点均显著高于对照组,其中24h为最显著。

统计学分析
应用SPSS软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x ±s)表示,采用t检验,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示有显