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免疫印迹实验

服务内容：

1、从动物细胞、人或者动物组织、细菌、植物、灭活病毒等样品中提取蛋白样品。

2、对蛋白样品进行半定量分析

3、western检测

电泳：聚丙烯酰氨凝胶电泳分离蛋白样品

转膜：湿转

抗体孵育：使用抗体检测膜上的特定蛋白

信号收集：采用ECL发光法和chemidoc MP进行信号收集分析

样品要求：

细胞＞1*107，组织＞30mg，菌体湿重＞10mg，植物＞100mg，血清＞50ul

服务项目及收费标准：

客户提供：

1、新鲜或者正确保存的样品（按照我们的要求提供）

2、目的蛋白的一抗，

3、阳性对照（尽量提供），

4、相关文献

提供给客户：

1、预实验的检测结果（扫描图片），预实验采用1-3个一抗稀释度；

2、正式实验结果（扫描图）

3、完整的实验报告

4、灰度值分析（可选）

服务说明

1、提供的蛋白量与目的待检测的蛋白数量有关，蛋白数量增加相应的样品量也要增加；

2、胞浆蛋白和胞核蛋白样品来源为：哺乳动物细胞。

3、每张膜样品数量为1-8个（10孔胶）或者1-13个(15孔胶),不足一张膜的按一张膜收取；

以10孔胶为例：

7个样品，1个蛋白抗体，算1张膜；9个样品，1个蛋白抗体，算2张膜；

7个样品，2个蛋白抗体，算2张膜；9个样品，2个蛋白抗体，算4张膜；

如客户有特殊上样要求，按涉及的实际膜数量进行计算。

4、选取部分样品进行预实验，参考蛋白一抗说明书进行3个稀释度抗体的预实验。

5、向客户反馈预实验结果，等待客户反馈后进行是否进行正式实验。

6、请客户提供有质量保证的一抗。抗体的使用量通过预实验后进行确认，不回收利用一抗。

7、需要对膜上蛋白进行剥离进行重复使用膜的，请事先说明；

8、建议提供蛋白的阳性对照品；

9、免费提供普通内参：beta-actin，GAPDH，beta-tubulin;

10、如需进一步数据分析，条带灰度值的读取，以及符合论文发表，请另询价；

11、对条带结果有特殊要求的，请另询价；

12、双方签订合同后，收取70%的款项后启动实验；

13、WB特殊要求请咨询

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