CRISPR / Cas9上海吉凯基因化学技术有限公司

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技术服务信息

服务名称:CRISPR / Cas9
服务类别:分子生物学服务 - 基因组分析服务
价格:询价
允许参观:协商决定
所在区域:上海.上海
更新时间:2019/7/25 9:21:00
浏览人数:110
诚信指数:786点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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上海吉凯基因化学技术有限公司
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技术服务详细描述

CRISPR / Cas9 

 CRISPR/Cas9是一种能够对基因组的特定位点进行精确编辑的技术。其原理是核酸内切酶Cas9蛋白通过导向性RNA(guide RNA, gRNA)识别特定基因组位点并对双链DNA进行切割,细胞随之利用非同源末端连接(Non homologous End Joining,NHEJ)或者同源重组(Homologous Recombination, HR)方式对切割位点进行修复,实现DNA水平基因敲除或精确编辑。

CRISPR / Cas9 基因敲除

利用CRISPR / Cas9 进行单基因敲除

目前研究最透彻、应用最广泛的II 型-CRISPR/Cas9 系统由两部分组成:

1. 单链的guide RNA(single-guide RNA,sgRNA)

2. 有核酸内切酶活性的Cas9 蛋白

CRISPR/Cas9 系统利用sgRNA 来识别靶基因DNA,并引导Cas9 核酸内切酶剪切DNA(图1)。当基因组发生双链DNA 断裂后,细胞通过非同源性末端接合(Non-homologous end joining, NHEJ) 将断裂接合,在此过程中,将随机引入N 个碱基的缺失或增加,若N 非3 的倍数,则目的基因发生移码突变,实现基因敲除。CRISPR 相对ZFN,TALEN 等基因打靶技术而言更为简单,廉价,高效,已经得到广泛应用。

                                           图1 CRISPR / Cas9 KO 原理


CRISPR/Cas9 基因敲除优势



RNA 干扰是从mRNA 水平对目的基因进行敲减,而Cas9 是从基因组水平对基因进行敲除,可完全消除目的基因在细胞内的表达,靶蛋白的功能也因此完全丧失。此外,CAS9 靶点选择范围可以扩大到所有基因组序列,如启动子、内含子等等都可以被剪切(表1)。

                                   表1 CRISPR/Cas9 基因敲除与RNAi 比较

产品介绍


CRISPR/Cas9慢病毒






CRISPR/Cas9腺相关病毒




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