rAAV病毒包装:rAAV介导基因shRNA干扰武汉枢密脑科学技术有限公司

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技术服务信息

服务名称:rAAV病毒包装:rAAV介导基因shRNA干扰
服务类别:分子生物学服务 - 病毒转染系统服务
价格:询价
允许参观:允许参与实验
所在区域:湖北.武汉
更新时间:2019/9/16 9:13:00
浏览人数:23
诚信指数:529点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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武汉枢密脑科学技术有限公司
地址:
武汉市东湖高新技术开发区光谷七路128号 中科开物产业园枢密脑科学技术有限公司
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430074
电话:
15327213341
传真:
027-65023363
联系人:
李娟
所在区域:
湖北·武汉
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技术服务详细描述

腺相关病毒(Adeno-associated VirusAAV)属于细小病毒科(parvoviridae),单链DNA病毒,经过改造的rAAV病毒工具已被广泛的应用在动物水平的基因表达、基因操作和基因治疗。

RNA干扰(RNA interfering,RNAi)现象是由与靶基因序列同源的双链RNA引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。由于RNAi具有高度的序列专一性,可以特异地将特定的基因沉默,从而获得基因基因功能丧失或基因表达量的降低。因此可以作为功能基因组学研究的一种强有力的工具。RNAi技术可以广泛应用到包括功能学,药物靶点筛选,细胞新号传导通路分析,疾病治疗等。


枢密科技采用2套rAAV制备方法:
1.AAV无辅助病毒系统(AAV Helper-Free System):
该系统利用已经明确与调节AAV复制和表达的腺病毒基因产物,并且将这些基因产物通过转染引进宿主细胞。在AAV Helper-Free System中,生产具感染性的AAV病毒颗粒所需的腺病毒基因产物(例如:E2AE4VA RNA基因)大部分由与其他质粒共转染进细胞的pHelper质粒提供,其余的腺病毒基因产物由稳定表达腺病毒E1基因的AAV-293宿主细胞提供。AAV-293细胞是经过改良HEK293腺相关病毒生产能力而衍生出的亚克隆细胞系。由于不再需要活的辅助病毒,AAV Helper-Free System提供一个更安全,更便利的替代逆转录病毒和腺病毒的基因传递系统。


2.新型杆状病毒系统制备rAAV的方法:
该系统可通过穿梭载体灵活装载外源基因的片段,并在细菌内高效重组到杆状病毒基因组上。再将抽提出的重组杆状病毒基因组DNA经转染Sf9昆虫细胞,产生有感染活性的重组杆状病毒。然后,利用重组杆状病毒(BEV)感染悬浮培养的Sf9细胞生产rAAV。新型杆状病毒系统灵活性高、通用性强、病毒质量高、产量高,适于大规模放大生产,rAAV纯化后能够达到很高的纯度,生物安全性高。

枢密科技rAAV介导基因干扰服务流程

可选择的rAAV-shRNA干扰载体

功能描述编号产品名称Cre依赖标签
直接表达shRNA
直接表达shRNAPT-0916rAAV-U6-shRNA(scramble)-CMV-EGFP-pA EGFP
PT-0923rAAV-U6-shRNA(scramble)-CMV-mCherry-pA  mCherry
结合cre实现特异性干扰
结合cre实现特异性干扰PT-0900rAAV-Ef1a-mCherry-U6-Loxp-CMV-EGFP-loxp-shRNA(scrambleCre依赖mCherry
PT-0941rAAV-U6-loxp-CMV-EGFP-loxp-shRNA(scramble)-pA Cre依赖EGFP
PT-0967rAAV-U6-loxp-CMV-mCherry-loxp-shRNA(scramble)-pA Cre依赖mCherry
miR-30a特异性干扰系类
miR-30a特异性干扰系类PT-0933PFD-rAAV-hSyn-EGFP-5'miR-30a-shRNA(scramble)-3'-miR30a-WPREs  EGFP
PT-1330PFD-rAAV-GFAP-EGFP-5'miR-30a-shRNA(scramble)-3'-miR30a-WPREs EGFP
备注:scramble 为无效序列:   CCTAAGGTTAAGTCGCCCTCG
shRNA(scrambleTarget GeneNone in human and mouse
更多腺相关病毒rAAV载体信息,欢迎咨询枢密科技

相关技术服务
rAAV介导基因过表达,rAAV介导lincRNA过表达,rAAV介导circRNA过表达

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