腺相关病毒（Adeno-associated Virus，AAV）属于细小病毒科（parvoviridae），单链DNA病毒，经过改造的rAAV病毒工具已被广泛的应用在动物水平的基因表达、基因操作和基因治疗。

RNA干扰（RNA interfering，RNAi）现象是由与靶基因序列同源的双链RNA引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。由于RNAi具有高度的序列专一性，可以特异地将特定的基因沉默，从而获得基因基因功能丧失或基因表达量的降低。因此可以作为功能基因组学研究的一种强有力的工具。RNAi技术可以广泛应用到包括功能学，药物靶点筛选，细胞新号传导通路分析，疾病治疗等。

枢密科技采用2套rAAV制备方法：
1.AAV无辅助病毒系统(AAV Helper-Free System)：
该系统利用已经明确与调节AAV复制和表达的腺病毒基因产物，并且将这些基因产物通过转染引进宿主细胞。在AAV Helper-Free System中，生产具感染性的AAV病毒颗粒所需的腺病毒基因产物(例如：E2A，E4和VA RNA基因)大部分由与其他质粒共转染进细胞的pHelper质粒提供，其余的腺病毒基因产物由稳定表达腺病毒E1基因的AAV-293宿主细胞提供。AAV-293细胞是经过改良HEK293腺相关病毒生产能力而衍生出的亚克隆细胞系。由于不再需要活的辅助病毒，AAV Helper-Free System提供一个更安全，更便利的替代逆转录病毒和腺病毒的基因传递系统。

2.新型杆状病毒系统制备rAAV的方法：
该系统可通过穿梭载体灵活装载外源基因的片段，并在细菌内高效重组到杆状病毒基因组上。再将抽提出的重组杆状病毒基因组DNA经转染Sf9昆虫细胞，产生有感染活性的重组杆状病毒。然后，利用重组杆状病毒（BEV）感染悬浮培养的Sf9细胞生产rAAV。新型杆状病毒系统灵活性高、通用性强、病毒质量高、产量高，适于大规模放大生产，rAAV纯化后能够达到很高的纯度，生物安全性高。

枢密科技rAAV介导基因干扰服务流程

可选择的rAAV-shRNA干扰载体