AAV相关病毒包装服务武汉枢密脑科学技术有限公司

银牌供应商 

技术服务信息

服务名称:AAV相关病毒包装服务
服务类别:分子生物学服务 - 病毒转染系统服务
价格:询价
允许参观:允许参与实验
所在区域:湖北.武汉
更新时间:2019/9/16 9:12:00
浏览人数:40
诚信指数:529点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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武汉枢密脑科学技术有限公司
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传真:
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联系人:
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技术服务详细描述

AAV相关病毒包装服务

腺相关病毒(Adeno-Associated Viral VectorAAV)属于微小病毒科( parvovirus),为无包膜的单链线状 DNA 病毒。AAV 的基因组约 4700bp,包括上下游两个开放读码框架(ORF),位于分别由 145 个核苷酸组成的 2 个反向末端重复序列(ITR)之间。 由于腺相关病毒具有宿主范围广、安全性高、免疫原性低、表达稳定和物理性质稳定等优点,已被广泛地应用于基础研究和临床试验中,并且腺相关病毒载体已成为世界上最常用的基因治疗载体之一。

AAV病毒特点

1.安全性高,目前还没有发现AAV对人体致病;每10个人中就有8个人在一生中会感染AAV,而rAAV更是去除了96%AAV基因组,进一步确保了安全性。目前唯一通过欧盟药监局的基因治疗药物Glybera也是一种rAAV

2.免疫原性低:当AAV用局部大剂量感染肌肉、脑、眼等组织时,很少有感染上的细胞之后被免疫系统所清除。这种特性对于动物实验上显然极有帮助。

3.感染谱广:几乎所有处于分裂期和静止期的细胞都可以使用AAV来感染。

4.表达时间长:rAAV可在宿主细胞中形成附加体(episome)存在于细胞核中,在细胞分裂不旺盛的组织中可持续表达5个月以上。

5.扩散性强:rAAV具有远高于腺病毒和慢病毒的扩散性,可以穿透血脑屏障,是最理想的神经元和胶质细胞感染工具。

6.高稳定性:rAAV病毒可使用冰袋运输,并且对氯仿等试剂具有抗性

7.特异性强:rAAV有十数种常用的血清型,不同的血清型对不同的脏器有较高的识别及感染能力。

枢密科技采用2套rAAV制备方法:
1.AAV无辅助病毒系统(AAV Helper-Free System):
该系统利用已经明确与调节AAV复制和表达的腺病毒基因产物,并且将这些基因产物通过转染引进宿主细胞。在AAV Helper-Free System中,生产具感染性的AAV病毒颗粒所需的腺病毒基因产物(例如:E2A,E4和VA RNA基因)大部分由与其他质粒共转染进细胞的pHelper质粒提供,其余的腺病毒基因产物由稳定表达腺病毒E1基因的AAV-293宿主细胞提供。AAV-293细胞是经过改良HEK293腺相关病毒生产能力而衍生出的亚克隆细胞系。由于不再需要活的辅助病毒,AAV Helper-Free System提供一个更安全,更便利的替代逆转录病毒和腺病毒的基因传递系统。
2.新型杆状病毒系统制备rAAV的方法:
该系统可通过穿梭载体灵活装载外源基因的片段,并在细菌内高效重组到杆状病毒基因组上。再将抽提出的重组杆状病毒基因组DNA经转染Sf9昆虫细胞,产生有感染活性的重组杆状病毒。然后,利用重组杆状病毒(BEV)感染悬浮培养的Sf9细胞生产rAAV。新型杆状病毒系统灵活性高、通用性强、病毒质量高、产量高,适于大规模放大生产,rAAV纯化后能够达到很高的纯度,生物安全性高。
AAV载体不同血清型

研究发现 AAV 具有多种血清型,各种不同血清型的 AAV 载体的主要区别是衣壳蛋白不同,因此对不同的组织和细胞的转染效率存在差异。目前枢密科技提供有12种不同的 AAV 血清型可供客户选择,建议客户针对不同组织器官选择相应血清型的 AAV 病毒,见表。

  12种不同血清型AAV对各组织器官细胞的亲和性 


AAV诱导凋亡与抑制相关产品及货号

AAV化学遗传相关产品及货号

AAV光抑制相关产品及货号


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