ELISA北京亿鸣复兴生物科技

银牌供应商 

技术服务信息

服务名称:ELISA
服务类别:免疫学服务 - 其它
价格:询价
允许参观:协商决定
所在区域:北京.
更新时间:2019/10/22 19:51:00
浏览人数:39
诚信指数:63点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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北京亿鸣复兴生物科技
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技术服务详细描述

ELISA检测服务

 

结果展示

 

          夹心法标准曲线ELISA检测标准曲线示例


           竞争法ELISA检测标准曲线示例

ELISA样本处理方法

1. 血清

血清是ELISA实验最常用的样本,其预处理也十分简单。 使用无热原无内毒素的试管或离心管采集血液样本,将试管或离心管在室温下放置2小时或4℃过夜,分离出血清(建议倾斜试管或离心管以扩大液面的横截面,使血清可以更大程度地分离出来)。4℃下以1000×g离心20分钟,小心收集上清液(血清),立即进行测定。建议在-20℃-80℃下将收集的血清分装保存,避免反复冻融。

2. 血浆

使用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液样本,采集后30分钟内,4℃下以1000×g离心15分钟,小心收集上清液(血浆)。建议在-20℃-80℃下将收集的血浆分装保存,避免反复冻融。样本应避免溶血或高血脂。常见的抗凝剂包括EDTA,肝素钠,枸橼酸钠等。检测前请仔细阅读ELISA试剂盒说明书,查看该试剂盒针对抗凝剂是否有特殊要求。

3. 细胞培养上清

将细胞培养上清液吸入离心管中并以1000×g离心20分钟,除去细胞碎片和杂质,收集上清液备用,样本保存在-20℃-80℃,避免反复冻融。

4. 细胞

(1)吸出培养板中的培养基,用胰蛋白酶消化细胞,然后加入适量的培养基将培养板上的细胞冲洗干净。悬浮细胞可以省略该步骤。

(2)将细胞悬浮液收集到离心管中,以1000×g离心10分钟,然后吸去培养基,用预冷PBS洗涤细胞3次。

(3)加入适量的预冷PBS(建议在使用前立即加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。在6孔培养板中,每个孔需要150-250μLPBS来重悬细胞。

(4)使样本在-20℃-80℃条件和室温条件下反复冻融,重复冻融过程数次,直至细胞完全裂解。也可以使用超声波细胞破碎器超声处理悬浮液来裂解细胞。

(5)4℃下以10,000×g离心10分钟,去除细胞碎片,收集上清液, -20℃-80℃保存,避免反复冻融。

5. 组织匀浆

(1)用预冷的PBS0.01MPH7.4)冲洗组织以除去表面残留的血液或杂质。

(2)将组织块称重,然后切成尽可能小的碎块,以便充分匀浆。

(3)加入适量的预冷PBS(体积取决于组织的重量,9 mL PBS适用于1 g组织,建议使用前立即在PBS中加入适量蛋白酶抑制剂),用玻璃匀浆器在冰上或冰浴中充分匀浆。

(4)将匀浆液吸入离心管中,4℃ 下以5000×g离心5~10分钟,收集上清液,保存至-20℃-80℃,避免反复冻融。

6. 尿液、唾液及其他生物体液

1000×g离心20分钟,收集上清液,立即进行测定。

一般来说,由于ELISA实验只能检测可溶性蛋白质的含量,因此要求样本应清晰透明并离心除去沉淀物或悬浮物质。为确保实验的准确性, -20℃-80℃保存的样本应在1-6个月内完成检测,4℃保存的样本在一周内完成检测。此外,样本中不能含有会抑制HRP活性的NaN3,否则会造成假阴性结果。

 

亿鸣复兴生物科技服务流程

 

亿鸣复兴生物科技服务项目

【电话】 010-62895234/18611436905

【邮箱】 shaopingping@esyan.cn

【官网地址】 www.ymbio.com

【地址】 北京市海淀区世宁大厦1405

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