技术服务信息
技术服务详细描述
1.研究背景介绍：
肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是一组以腹部不适和疼痛伴排便习惯和（或）排便性状改变为特征的消化系疾病，是最常见的功能性胃肠疾病。该疾病可以分为腹泻型IBS（IBS-D）、便秘型IBS（IBS-C）以及便秘腹泻交替型IBS（IBS-A）。其中IBS-D最常见。IBS-D的发病受多种因素影响，如饮食、心理因素、遗传、环境因素、应激、肠道感染等，通过肠道菌群、肠道低度炎症及脑-肠轴途径造成肠道黏膜屏障功能的破坏、胃肠道动力及内脏高敏感性异常，进而产生相关症状。但是上述因素如何相互作用以及具体机制如何目前尚无明确结论。
近年来，有研究发现介导免疫反应的TLR4/MyD88/NF-κB信号通路在IBS-D患者肠道粘膜存在表达上调，提示TLR4/MyD88/NF-κB信号通路在IBS-D发病中起到重要作用，故本研究拟通过观察IBS-D动物模型肠道粘膜标本TLR4/MyD88/NF-κB信号通路与正常大鼠该信号通路的差异，并阻断该信号通路后观察IBS-D大鼠的症状、肠道粘膜的微观结构的变化，明确TLR4/MyD88/NF-κB信号通路在IBS-D发病中的作用。
2.技术方案：
2.1建模-信号通路激活：
选择SPF级Wistar大鼠为研究对象，采用冷-热结合法建立IBS-D大鼠模型。
2.2建模后的信号通路干预：
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分组 |
干预处理（A组） |
干预对照（B组） |
空白对照（C组） |
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操作 |
建模后腹腔注射二硫代氨基甲酸***烷（12只） |
建模后腹腔注射生理盐水（12只） |
健康SPF级大鼠（12只） |
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目的 |
干预后A组与C组大鼠肠道粘膜TLR4、NF-ΚB、组织形态的超微结构、粪便中双岐杆菌、乳酸杆菌及肠球菌数量及血清IL-8、IL-10、TNF-α差异 |
干预后B组与A组肠道粘膜TLR4、NF-κB、粪便性状、肠道粘膜的超微结构、及粪便中双岐杆菌、乳酸杆菌、血清IL-8、IL-10、TNF-α差异 |
形成空白对照 |
2.3.整体技术路线图：
2.4拟解决的问题：
TLR4/NF-κB信号通路在IBS-D发生发展过程中的作用？
药物干预后，即NF-κB信号通路被阻断后对IBS-D的发生可能发挥的作用?
TLR4/NF-κB信号通路能否成为IBS-D治疗具有潜力的靶点？
3项目评估：
IBS-D模型的建立：建模过程复杂，周期长，难度中等。
实验分组后至少需要保证每组5只的模型小鼠生存，检测的具体指标较多，通过不同的途径和方法进行机理探究，从分子水平，蛋白水平，病理形态学，菌群整体改变等多个角度进行疾病进程的验证。
信号通路的干预结果能否达到预期？
4项目流程：
5.实验结果（部分展示）：
结果一：不同处理组TLR4/NF-κB信号通路的表达量差异（部分图片）
结果说明：与C组大鼠相比，A组大鼠肠道组织TLR4、NF-κB明显升高（P＜0.05）；与A组大鼠相比，B组大鼠肠道组织TLR4、NF-κB明显降低（P＜0.05）。
结果三：不同处理组肠粘膜的病理形态差异（部分图片）
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