手把手教你操作肿瘤干细胞成球实验!!!北京百奥思科生物科技有限公司

技术服务信息

服务名称:手把手教你操作肿瘤干细胞成球实验!!!
服务类别:细胞生物学服务 - 细胞培养服务
价格:详询【微信】18632689188
允许参观:允许参与实验
所在区域:河北.廊坊
更新时间:2020/12/18 13:05:00
浏览人数:65
诚信指数:5点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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北京百奥思科生物科技有限公司
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河北固安肽谷生物医药产业园
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19931682702
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石老师
所在区域:
河北·廊坊
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技术服务详细描述

肿瘤干细胞成球实验


肿瘤干细胞是一群既具有自我更新能力又具有较强的侵袭迁移的细胞,对肿瘤的存活、增殖、转移及复发有着重要作用。肿瘤细胞的成球实验(成球大小及数目)是衡量肿瘤细胞干性的金标准。

成球能力是肿瘤干细胞体外鉴定的一个重要方法。其判断的是单个细胞在合适的条件培养基中自我更新的能力,一般用细胞球形成效率(Sphere Formation Efficiency,SFE)表示。

SFE的计算方法:SFE=每孔中直径大于75um的细胞球的个数 / 每孔中原始接种细胞的总数

通常情况下,需要检测细胞连续传代后的自我更新能力,此时就需要进行细胞球的传代。方法是,70μm的细胞筛收集培养10-14天后的细胞球,使用胰酶消化成单细胞,将合适数量的细胞铺入96孔板继续进一步培养10-14天,统计细胞球的个数,计算SFE。

实验步骤如下:

一、一次成球

1. 将状态良好的细胞消化后离心收集,去除含血清培养基。

2. PBS清洗细胞2次。

3. 细胞计数,用超低吸附的细胞培养板培养细胞(6孔板中每孔加入大约1000个细胞)。

4. 培养大约10天,观察细胞成球情况并计算SPF。

二、二次成球

1. 70μm的细胞筛过滤收集细胞球,胰酶消化。

2. 无血清培养基终止消化,PBS清洗细胞2次。

3. 重悬细胞,计数。

4. 用超低吸附的细胞培养板培养细胞(6孔板中每孔加入大约1000个细胞)。

5. 培养大约10天,观察细胞成球情况并计算SPF。

Hisham F. Bahmad,,Katia Cheaito,1Reda M. Chalhoubetal. 2018

标尺100 μm

MDL服务项目
动物实验相关、WB、IP和Co-IP服务、蛋白质纯化、蛋白质双向电泳、明胶酶谱、细胞增殖、细胞培养、细胞周期凋亡、平板克隆、免疫荧光、免疫组化、常规及特殊染色、包埋切片爬片、定量pcr、elisa检测服务、普通生化试剂盒检测、全自动生化检测项目等。


     (MDL部门动物模型,更多实验技术服务可详询)

MDL服务优势
项目均配备专职项目经理及技术支持,对每一项目进行全程跟踪反馈及管理,确保项目完成情况。周期短,价格优惠,质量保证,售后无忧;公司总部坐落于北京,实验室拥有4000多平的平台,拥有自己独立的实验室,相应的仪器设备及优秀的技术团队、销售团队,可随时参观,客户可参与实验。


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