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实时荧光定量PCR

实时荧光定量PCR

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产品名称: 实时荧光定量PCR

英文名称: QPCR

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广州维伯鑫生物技术有限公司
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相关知识:

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)自诞生之日起就决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法,而且也是一个能对核酸分子进行精确定量的有力工具。1996年,美国Applied Biosystems公司推出了一种新定量试验技术——实时荧光定量PCR,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。

技术原理:

PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时,探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

   样品准备条件:

细胞样品:收集细胞后放入液氮中速冻保存或速冻24 h后转入-80 °C冰箱保存;收集细胞后,视细胞量,直接加入1-1.5 mL Trizol溶解裂解细胞,再转入-80 °C冰箱保存。

组织样品:动物组织一般取材后立即放入液氮中速冻保存,液氮冻存24 h后可转入-80 °C冰箱保存;组织样品同样可以采用Trizol溶解裂解后放入-80 °C冰箱保存。特殊组织(植物等)建议采用新鲜组织即刻提取RNA,逆转合成cDNA后-20 °C保存备用。

所有样品的处理和保存过程中,切忌反复冻融。

样品运输条件:样品运输条件根据实验样品的处理条件,可以选择液氮或者干冰运输。

服务内容:

         1)总RNA提取和质量检测;
         2)RNA逆转录为cDNA;
         3)免费设计引物/探针,进行qPCR检测,3个重复,内参免费,无需提供任何试剂;
         4)实验数据整理和分析。

您只需提供:新鲜且足量的样品(组织不少于50 mg,细胞不少于106),或纯化好的符合实验要求的总RNA或cDNA(≥ 5 μg),检测的基因信息,相关文献等。

我们提供:免费设计引物/探针,实验报告单,qRT-PCR原始数据,扩增曲线,溶解曲线,数据分析结果等。

重要意义与应用:
无论是对遗传疫病(如地中海贫血和血友病)、感染性疾病(如细菌、HBV、HPV、EBV、CMV、TB、支原体和衣原体等)以及肿瘤进行基因诊断,还是研究药物对基因表达水平的影响,或者监控药物和疗法的治疗效果,以及对食品及环境中菌群种类(如食品中污染的沙门氏菌)的检测,实时荧光定量PCR技术都可以发挥很大的作用。

公司介绍:                                                                   
       广州维伯鑫生物科技股份有限公司是一家从事生物医学科研技术服务和产品的高科技公司,坐落于广州科学城国家科技企业孵化器内。搭建了完善的实验平台,包含2个标准化细胞房、动物房、国家标准的PCR实验室、蛋白病理综合实验室及千余平方的GMP洁净厂房等,并与国内外知名医学院校和科研机构建立了良好的合作关系,先后主持了教育部产学研项目和广东省、广州市创新基金项目,并获得广东省科学技术厅、广东省财政厅、广东省国家税务局、广东省地方税务局联合认定的高新技术企业。
       维伯鑫生物科研团队具有丰富的科研经验,立足于生物医学领域,以客户需求为导向,为广大科研工作者建立了实验方案评估和优化、动物实验、细胞实验、基因水平实验、蛋白质水平实验、整体课题协作服务等平台。多年来,维伯鑫生物秉承“专业、专注;精细、精确”的服务态度协助广大科研工作者完成了数百项国家自然科学基金、省自然科学基金及各市、地区基金项目,为客户了提供最佳的实验设计优化服务和专业的实验解决方案,帮助科研工作者缩短科研周期、节省实验成本,使客户的科学研究具有持续性,广受好评。

服务流程:

维伯鑫生物科研平台包括:


具体实验案例:
 

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