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生物素标记多肽合肥合生生物有限公司

技术服务信息

服务名称:生物素标记多肽
服务类别:蛋白相关服务 - 蛋白制备服务
价格:500元
允许参观:允许参与实验
所在区域:安徽.合肥
更新时间:2021/7/12 10:57:00
浏览人数:6
诚信指数:5点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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合肥合生生物有限公司
地址:
安徽省合肥市高新区杭埠路23号5楼501
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0551-68788198
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联系人:
江经理
所在区域:
安徽·合肥
邮件:
公司展台:

技术服务详细描述

生物素标记多肽

在许多蛋白研究领域中,生物素标记肽通常与亲和素结合而被检测或纯化: 免疫印迹(WB)、ELISA、免疫沉淀 (IP)、多肽亲和纯化、免疫组化 (IHC)、细胞表面标记、流式细胞术/荧光激活细胞分类(FACS)。

合生生物提供生物素标记肽合成服务。通常,生物素可被标记在N端或C端(经由Lys)。我们推荐N端标记,其标记的成功率更高,所需时间更短,操作更简洁。

生物素可通过各种不同的linker或spacers与多肽隔离。一般建议引入间隔器如Ahx(一个6碳链接器)让生物素更稳定或更灵活。

合生生物提供N端或C端生物素标记:Biotin (N terminus), Lys(Biotin)(middle), Lys(Biotin)(C terminus)。

带有linker(Ahx)的生物素化: Biotin-Ahx (N terminus), Lys(Ahx-Biotin)(middle), Lys(Ahx-Biotin)(C terminus)。

 

 

 

生物素标记肽的Pull-down实验方案分析

生物素标记肽可与亲和素磁珠共轭以生成树脂,用于肽pulldown试验。先把生物素标记肽上样至Immobilized streptavidin beads (Pierce) 锚定有亲和素的磁珠上,再与细胞裂解液孵育。细胞裂解于1%(v/v)Nonidet P-40, 

150 mM sodium chloride, 50 mM Tris-HCl, pH 7.5, protease inhibitors (Complete Tablets, Roche AppliedScience), 加入 1 mM sodium orthovanadate作为***酸酶抑制剂。等量的蛋白质分别与被锚定的多肽在4℃孵育6小时。经过大量洗涤,在SDS样品buffer中煮沸,结合蛋白可从被锚定的多肽洗脱下来,或者,用50 mM dithiothreitol将多肽与蛋白复合物从磁珠中断开。将来自活性肽和对照目标肽pull-downs的洗脱液合并,以作进一

步的分析。

 

 

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