酵母单/双杂交市场宣传资料

一、酵母单杂交：

酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸-蛋白相互作用的工具，被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控，如鉴别DNA结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析DNA结合结构域信息等。

二、酵母双杂交：

酵母双杂交及系统是一种鉴定和检测蛋白质相互作用的研究方法，因其具有灵敏性高、功能强大、适用范围广等特点，现已被应用于多个研究领域。

（一）核蛋白酵母双杂交：

核蛋白酵母双杂交技术最初由Fields等人在研究酵母转录因子GAL4性质时建立，后续经过不断改进已发展成为一种成熟的蛋白-蛋白互作研究工具，具有简便、灵敏、可反映蛋白在活细胞内互作真实情况的特点，被广泛应用于互作蛋白的筛选、蛋白相互作用的鉴定/验证、蛋白互作机理的探究、蛋白连锁图谱绘制等工作。

（二）膜蛋白酵母双杂交：

DUALmembrane技术在传统的酵母双杂交系统的基础上，巧妙地利用分离的泛素系统（split-ubiquitin）进行蛋白质相互作用的筛选；泛素作为降解信号分子，人为分成两部分：N端（Nub），C端（Cub），互补重构的完整泛素分子可被泛素专一性蛋白酶（UBPs）识别，从而导致与泛素相连的蛋白被酶解。

三、多领域的研究利器：

植物：自交不亲和机理研究……

病毒：朊蛋白、病毒蛋白相互作用蛋白筛选……

信号通路：转录因子、雌激素α受体相互作用蛋白筛选……

癌症医学：癌症相关蛋白、凋亡相关蛋白相互作用蛋白筛选……

寄生虫医学：毒力因子致病机制研究、半乳糖凝集素互作蛋白筛选……

基础原理研究：肌球蛋白、蛋白酶体调节因子相互作用蛋白筛选、受精卵发育……

四、独特的技术优势：

一站式辅助检测手段方便快捷，得到可靠的实验结论；

多年文库构建经验，4种优化的Total RNA提取技术方案可以有效保证Total RNA的纯度和完整性，保证样本的多样性；

高效的SM定向三框文库构建技术可以保证文库的阳性率在98%以上，且一份cDNA样本连接三个不同的读码框载体可以轻松实现三框文库的质控指标零差异，减少文库差异对筛选结果的影响；

定向改造了pPR3-N系列载体为pPR3-GW载体，可以轻松实现核蛋白文库到膜蛋白文库的一步LR反应，获得膜蛋白酵母双杂交文库。

五、文库构建策略比较：

六、服务流程：

（一）酵母单/双杂交文库构建：

接收订单及样品→总RNA提取→mRNA纯化→反转录→双链cDNA合成及纯化→共转至酵母感受态细胞（改造的Y1H）→转化效率测定→文库效价测定→结果交付

（二）酵母单杂交文库筛选：

接收订单及样品→诱饵载体及诱饵菌株构建→自激活检测→克隆数计算→阳性克隆菌株鉴定→结果交付

（三）酵母双杂交文库筛选：

接收订单及样品→诱饵载体的构建→毒性检测→测定杂交效率→阳性克隆菌株鉴定→结果交付

七、服务内容：

（一）酵母单杂交：