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免疫电镜、透射电镜、扫描电镜、病理检测HE、Masson、油红o、PAS等染色、TUNEL检测、蛋白表达纯化、抗体检测等技术服务北京科沿有道生物科技有限公司

技术服务信息

服务名称:免疫电镜、透射电镜、扫描电镜、病理检测HE、Masson、油红o、PAS等染色、TUNEL检测、蛋白表达纯化、抗体检测等技术服务
服务类别:科研实验整体外包服务 - 整体实验服务外包
价格:150元
允许参观:允许参与实验
所在区域:北京.北京
更新时间:2021/9/8 16:18:00
浏览人数:13
诚信指数:5点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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供应商联系卡

北京科沿有道生物科技有限公司
地址:
昌平区能源西路1号奇点中心3层
邮编:
102200
电话:
18201011950
传真:
18201011950
联系人:
所在区域:
北京·北京
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技术服务详细描述

原核蛋白表达技术服务(大肠杆菌体系)市场宣传资料

科沿有道的蛋白表达核心技术和资源优势决定了我们卓尔不凡的服务品质,每年高效完成2000多种蛋白表达服务,平均每工作日交付8个蛋白!我们具有数十种商业表达载体和自主开发的pCzn1/pCzn2/pSumo-Mut载体,熟练运用多种表达宿主菌,可以根据实际需要,选用不同融合标签蛋白、不同抗性、不同作用元件的表达载体和不同性质的表达宿主。同时,针对大标签蛋白,SUMOGSTTrxMBP之类的,可以附送200ug标签蛋白,和少量的标签抗体,供您做后续试验的对照,以及检测。

5天可溶性蛋白急速交付套餐

服务内容

周期

交付标准

备注

·基因优化合成

 

质粒+克隆菌株+表达菌株

WB检测

(周期增加2个工作日)

·蛋白表达纯化

5个工作日

1-3mg蛋白,纯度>85%

10个工作日

3-5mg蛋白,纯度>85%

10个工作日

5-10mg蛋白,纯度>85%

 

10mg以上蛋白,纯度>85%

 

上清表达保证型套餐

1. 客户提供目的序列,钟鼎进行基因优化:mRNAtRNA丰度、密码子偏爱性等多维度优化。

2. 同时构建三个载体:pCzn1PGEX-4T-1pCzn2

服务内容

周期

交付标准

备注

·基因合成

 

质粒+克隆菌株+表达菌株

WB检测

(周期增加2个工作日)

·亚克隆

1-2

不同的表达质粒+表达菌株

·表达条件优化

3-4

分析表达图片

·蛋白表达纯化

5个工作日

1-3mg蛋白,纯度>85%

 

3mg以上蛋白,纯度>85%

 

原核蛋白表达验证型套餐

客户提供

服务内容

周期

验证型套餐A特色:使用客户提供的表达载体,无论表达是否成功,都收取相应的表达检测费用。

1、无污染的质粒,最小量不低于100ng

2、原始质粒图谱及序列文件

3、插入基因后质粒的商业测序报告

使用客户提供的质粒重新转化AE宿主菌,验证目的蛋白是否表达,并分析目的蛋白的表达形式(上清或包涵体表达)

2-4

验证型套餐B特色:客户提供质粒,亚克隆至科沿有道的特色表达载体,转化配套的菌株,表达成功后收费,不成功仅收亚克隆费。

1、无污染的质粒,最小量不低于100ng

2、原始质粒图谱及序列文件

3、插入基因后质粒的商业测序报告

使用科沿有道的特色质粒,转化低温AE宿主菌,验证是否表达,并分析目的蛋白的表达形式(上清或者包涵体)

1-2

 

科沿有道特色原核表达体系

Arctic Express™ 11℃超低温诱导体系

构建了带有His标签(pCzn1-His原核表达载体)和Sumo标签的特色质粒,同时筛选了低温诱导体系的Arctic Express高效表达菌株,可以在11℃超低温诱导表达,大大提高了蛋白可溶表达的几率,增加了表达成功率和原核蛋白产物的活性几率。

第二代自诱导体系

第二代自主研发的核心表达载体pCzn2,携带pelB信号肽,分泌表达蛋白至细胞周质,配合自诱导体系,从根本上提高上清表达概率及原核蛋白产物活性,同时避免了IPTG给细胞带来的毒害作用,满足工业化大生产的需求。

案例展示

我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,在获得重组蛋白的同时,我们也会提供相应的原始数据和原始图片,我们的客户可以直接使用科沿有道提供的实验数据和图片用于论文撰写和发表,不需要再额外花费精力重复实验。另一方面,我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。

一、表达条件优化

二、蛋白表达鉴定

三、蛋白表达纯化


酵母细胞表达系统市场宣传资料

酵母表达系统是一种最经济高效的真核蛋白表达系统,可以成功实现胞内表达或是分泌表达,且其放大培养基相对廉价,培养条件要求不高,适宜工业放大。与哺乳动物细胞表达系统一样,酵母蛋白表达系统能够对所表达蛋白进行例如糖基化、酰基化、脂基化、***酸基化等保证蛋白天然构象的修饰,可用于制备非常接近天然蛋白的具有高附加值的蛋白原料。

北京科沿有道生物科技有限公司的酵母蛋白表达平台由多年从事酵母表达操作的实验人员组成,经验丰富,采用自行改造的高效分泌载体和宿主组合,可在最大程度上实现最高质量的蛋白表达。经客户反馈,以我平台所制备的蛋白原料为抗原所制备的单抗均具有很好的识别天然蛋白的优良特性。

一、蛋白表达系统选择:

表达系统

系统优势

适用于

科沿有道特色

原核

大肠杆菌

目的基因表达量高、成本低、培养件简单、生产迅速、可拓展性强、化操作简单、容易形成二硫键

原核蛋白、简单真核蛋白

在表达包括可溶性蛋白、包涵体、融合蛋白等方面,拥有丰富的经验和专业技术,能解决蛋白表达过程中的各种瓶颈问题

枯草芽孢杆菌

非致病性、无内毒素、可大量分泌某些胞外蛋白、培养条件简单、生产迅速、无明显的密码子偏爱性、不易形成包涵体

胞外蛋白

采用基因工程突变改造的枯草芽孢杆菌做为表达宿主;采用自己改造的载体,可以提供胞内或胞外、组成型或诱导型的表达

真核

酵母细胞

经济高效,放大培养基廉价、培养条件简单、生产迅速、可拓展性强、分泌蛋白或细胞内表达的良好选择、蛋白分泌高效且允许简单纯化、广泛的翻译后修饰、无内毒素

工业菌种改良、放大

自行改造的高效分泌载体和宿主组合,可在最大程度上实现最高质量的蛋白表达

杆状病毒-昆虫细胞

基因容量大,外源基因表达效率高,有效的细胞折叠、中度可扩展性、广泛的翻译后修饰、糖基化与哺乳动物细胞类似、相对容易地酶促的去糖基化、无内毒素

病毒疫苗、信号蛋白、细胞因子、激酶等

采用AcNPV-sf9细胞和BmNPV-BmN细胞两种表达系统, 多表达系统、多宿主、多载体的选择性极大的提高了蛋白表达的成功率

哺乳动物细胞

较高的表达水平、中度的可扩展性、细胞的悬浮培养特性可大规模生产、有效的蛋白折叠、适合分泌蛋白、充分的翻译后修饰、无内毒素

复杂高等真核生物蛋白

采用特有的哺乳动物细胞表达载体和多种转染方法的组合方式,优化表达条件,提高转染效率,大大缩短实验周期,显著提高表达量

无细胞

操作简便,需时短,表达量高,系统开放较灵活,轻松表达特殊蛋白,制备蛋白复合物,及平行合成多种不同蛋白等

膜蛋白、毒蛋白

小量表达条件摸索,专业解决相关难题,大大缩短实验周期,提高表达量

二、服务流程:

方案沟通接收订单质粒构建蛋白表达蛋白纯化成果交付

三、客户提供:

目的蛋白信息或基因序列,质粒(也可以选择由科沿有道提供);

蛋白询价信息表(请点击下载中心,下载蛋白询价信息表后详细填写)。

四、最终交付:

纯化后蛋白纯品、表达菌株(收费);

蛋白表达结题报告,包括测序报告、实验条件、蛋白表达纯化检测结果。

五、服务说明:

服务名称

服务项目

服务内容

交付结果

服务周期

酵母细胞表达服务经济型套餐

原核克隆

基因的获得

核酸电泳图片

2

PCR扩增产物酶切连接到合适的载体

转化DH5α

重组质粒大量制备

线性化重组质粒

优化表达

电转化适宜的酵母宿主

酵母核酸电泳图

2-3

随机挑10株单菌落进行PCR鉴定

表达及纯化

PCR鉴定阳性菌落中选取一株做1L体系的放大表达

最终纯化产物SDS-PAGEWB

1-2

发酵液上清处理及一步纯化

纯化产物SDS-PAGEWestern Blot

1 L上清的纯化产物

酵母细胞表达服务标准型套餐

原核克隆

基因的获得

核酸电泳图片

2

PCR扩增产物酶切连接到合适的载体

转化DH5α

重组质粒大量制备

线性化重组质粒

优化表达

电转化适宜的酵母宿主

酵母核酸电泳图

5-6

用遗传霉素G418进行多拷贝子筛选

对多拷贝子克隆进行RCR鉴定

选取40株多拷贝子进行小量诱导表达

最终种子表达上清SDS-PAGE

表达及纯化

选取表达情况最好的,根据客户需要放大表达

最终纯化产物SDS-PAGEWB

1-2

发酵液上清处理及一步纯化

纯化产物SDS-PAGEWB

1L上清的纯化产物


大肠杆菌表达系统市场宣传资料

蛋白表达是现代工业、医疗和基础研究领域的重要组成部分,科沿有道蛋白表达平台可针对目的蛋白的特殊性质,专业解决蛋白表达相关难题,如蛋白产量较低、蛋白表达为包涵体、表达蛋白没有活性、表达特殊蛋白(如膜蛋白、毒性蛋白等)、制备蛋白复合物、特殊氨基酸标记技术等,帮助您获得任意想要的蛋白。

目前,科沿有道蛋白表达平台已成功为全球各地客户提供3000余种重组蛋白产品,涵盖人类疾病相关蛋白(细胞因子、***、酶、病毒抗原、重组抗体、片段抗体)、动植物蛋白和微生物蛋白。

一、服务流程:

方案沟通接收订单质粒构建蛋白表达蛋白纯化成果交付

二、服务说明:

服务名称

服务内容

交付内容

服务周期

普通型大肠杆菌重组蛋白表达

表达载体构建

表达质粒测序报告

1

感受态转化
表达菌株筛选

表达菌株
SDS-PAGE图谱

3工作日

蛋白表达纯化
标签切除

蛋白纯品(>90%纯度)

SDS-PAGE图谱

2-3

包涵体复性

蛋白纯品(>90%纯度)

SDS-PAGE图谱

2-3

上清保证型大肠杆菌重组蛋白表达

表达载体构建

表达质粒测序报告

1

Arctic表达菌株筛选

表达菌株SDS-PAGE图谱

3工作日

蛋白表达纯化
标签切除

蛋白纯品(>90%纯度)SDS-PAGE图谱

3-4

三、案例展示:

大肠杆菌表达系统

1. GFP蛋白原核表达通常以包涵体形式表达,普通光源下极难观察到绿色荧光。科沿有道通过对GFP序列进行突变,并对启动子进行筛选,优化培养条件,控制表达速率,用大肠杆菌表达的GFP蛋白,完全以可溶形式表达,自然光下可见强烈的绿色荧光。

2. 客户经过尝试在大肠杆菌DE3中表达目的蛋白A,未能获得上清蛋白,科沿有道采用Arctic Express表达体系,采用低温诱导和分子伴侣共表达方式,历经40个工作日,获得了在上清中表达的目的蛋白,得到客户的认可。

3. 客户经过尝试在大肠杆菌DE3中表达目的蛋白B,目的蛋白表达为包涵体。但是客户需要上清表达的蛋白进行后续实验,经过科沿有道Arctic Express表达体系,历经35个工作日,获得了在上清中表达的目的蛋白。

四、如何订购:

咨询订购:请详细填写重组蛋白表达项目信息咨询单信息后,发给项目经理

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