生物在线 - 让科研更便捷 :生命科学专业网,试剂,仪器,抗体,耗材在线查询

点突变服务武汉枢密脑科学技术有限公司

技术服务信息

服务名称:点突变服务
服务类别:分子生物学服务 - 其它
价格:具体详询
允许参观:允许参与实验
所在区域:湖北.武汉
更新时间:2022/5/23 14:32:00
浏览人数:27
诚信指数:536点
了解更多:进入公司展台
使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
点此求购 我要咨询
生物在线声明:以上所展示的信息由企业自行提供,内容的真实性、准确性和合法性由发布企业负责。生物在线对此不承担任何保证责任。

供应商联系卡

武汉枢密脑科学技术有限公司
地址:
武汉市东湖高新技术开发区光谷七路128号 中科开物产业园枢密脑科学技术有限公司
邮编:
430074
电话:
18140661572
传真:
027-65023363
联系人:
何晓斌
所在区域:
湖北·武汉
邮件:
公司展台:
扫一扫,关注我们

技术服务详细描述

点突变

简介

      CRISPR/Cas(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/ Cas)系统是目前被广泛运用的基因编辑系统,其原理是由CRISPR转录产生的gRNA介导Cas核酸酶靶向目标序列,对序列进行切割。其中最常用的是靶向DNA的CRISPR/Cas9系统,此系统是由II类CRISPR/Cas系统改造而来,能够在植物、细菌、酵母、鱼类及哺乳动物等多种细胞中,进行有效的靶向编辑,具有操作简易、效率高、以及作用靶位点多等优势。

      CRISPR/Cas9系统中sgRNA(short guide RNA)识别并结合目标基因的靶向序列,引导Cas9对结合位点进行剪切,产生DNA双链断裂,通过细胞内的同源重组修***式,将外源供体DNA定点导入至基因组的靶位点中,从而实现基因敲入。

CRISPR/Cas9基因敲入示意图(Eric Murillo-Rodríguez et al., Sleep and Vigilance, 2018)

      将同时包含Cas9和gRNA序列的质粒载体与携带点突变的Donor载体(Oligo)共转入细胞核,Cas9和gRNA的复合物会引起靶位点DNA双链断裂,而后细胞以外源携带目标点突变的Donor作为模板进行同源重组修复,将目标点突变重组到基因组靶位点。Cas9和gRNA的质粒载体携带抗性基因,可进行药筛,药筛完成后挑选单克隆培养。选择不同的克隆分别进行靶位点扩增及测序,筛选出点突变纯合的阳性克隆。


图1.点突变方案

图2.点突变载体

服务流程


应用

      1、细胞疾病模型造模

            通过HDR,携带点突变序列的donor oligo (ssODN)替换WT对应的碱基。

      2、细胞疾病模型修复

            通过HDR,携带WT序列的donor oligo (ssODN)替换对应的突变碱基。

参考文献

      [1]Eric Murillo-Rodríguez, Rocha N B , André Barciela Veras, et al. The End of Snoring? Application of CRISPR/Cas9 Genome Editing for Sleep Disorders[J]. Sleep and Vigilance, 2018, 2(1):1 3-21.


生物在线声明:以上所展示的信息由企业自行提供,内容的真实性、准确性和合法性由发布企业负责。生物在线对此不承担任何保证责任。

查看点突变服务 产品的用户还对以下产品感兴趣

  慢病毒RNAi干扰服务   [供应商:上海锐赛生物技术有限公司]
  抑制性消减杂交(SSH)技术服务   [供应商:上海迪奥生物科技有限公司]
  RT-PCR检测   [供应商:上海迪奥生物科技有限公司]
  普通PCR引物设计   [供应商:重庆波尔生物科技有限公司]
  甲基化特异性检测(MSP/qMSP/BSP)   [供应商:上海迪奥生物科技有限公司]
  多肽合成/多肽修饰   [供应商:上海闪晶分子生物科技有限公司]
  免疫蛋白印迹(Western blotting)技术服务   [供应商:生物医药纯化技术公共服务平台]
  荧光原位杂交fish服务   [供应商:上海拜力生物科技有限公司]
  普通PCR技术服务   [供应商:上海瑞晶生物科技有限公司]
  重组蛋白表达服务   [供应商:北京三博远志生物技术有限责任公司]

ADVERTISEMENT

找不到您所需的产品,发布求购试试?

标题:*
描述:
姓名:*
Email:*
单位:*
电话:*
地址:*
邮编:
资料: 需要 不需要
报价: 需要 不需要
报价: 需要 不需要
我已经阅读并同意生物在线的 《服务条款》《隐私政策》;我对帐户的使用及生物在线对帐户信息的披露将接受生物在线服务条款的约束并遵守中华人民共和国法律