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细胞增殖服务武汉枢密脑科学技术有限公司

技术服务信息

服务名称:细胞增殖服务
服务类别:细胞生物学服务 - 其它
价格:具体详询
允许参观:允许参与实验
所在区域:湖北.武汉
更新时间:2022/5/23 15:18:00
浏览人数:24
诚信指数:536点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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武汉枢密脑科学技术有限公司
地址:
武汉市东湖高新技术开发区光谷七路128号 中科开物产业园枢密脑科学技术有限公司
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430074
电话:
18140661572
传真:
027-65023363
联系人:
何晓斌
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湖北·武汉
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技术服务详细描述

细胞增殖

      细胞增殖(Cell Proliferation)是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老或死亡的细胞;同时,多细胞生物可以由一个受精卵,经过细胞的分裂和分化,最终发育成一个新的多细胞个体。细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。

      MTT检测法主要反映细胞的能量代谢,是检测细胞增殖活力的一种简便准确的方法,其原理是在活细胞生长和增殖过程中,线粒体内的脱氢酶可将黄色的MTT分解成蓝紫色的甲瓒(Formazan),生成的甲瓒量的多少与细胞的数量和细胞的活力成正比,而死细胞无此功能。二甲亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶标仪在490(570)nm波长处测量其光吸收值,可间接显示活细胞数量。

     WST-1是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先,MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-1和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。其次,WST-1产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次,WST-1比XTT和MTS更加稳定,使实验结果更加稳定。

      Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。CellTiter-Lumi™发光法细胞活力检测试剂盒(CellTiter-Lumi™ Luminescent CellViability Assay Kit),简称CTL发光法细胞活力检测试剂盒或CTL,是一种通过化学发光法测定细胞内ATP含量从而用于超高灵敏度、超宽线性范围定量检测活细胞数目的试剂盒。

      本试剂盒的性能基本达到甚至在有些方面优于国外同类产品。EdU法直接测定DNA合成,是细胞增殖检测最准确方法之一,是一种基于DNA合成过程中胸腺嘧***脱氧核苷(thymidine)类似物EdU(5-ethynyl-2‘ -deoxyuridine)的掺入,并通过随后的点击反应(Click reaction)使EdU被Alexa Fluor 所标记,从而实现简单、快速、高灵敏地检测细胞增殖的方法,可以有效地检测处于S期的细胞百分数。

      CFDA SE是一种广泛应用于细胞增殖与示踪研究的绿色荧光探针。CFDA SE本身不具有荧光性质,其可以通透细胞膜,自由进入细胞。CFDA SE进入细胞后,可被内源性酯酶(esterase)催化分解生成CFSE。CFSE不具有细胞膜通透性,而具有很高的荧光活性,能与细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应形成加合物,从而标记这些蛋白。被标记细胞的荧光非常均匀和稳定,每分裂一次子代细胞的荧光就减弱一半,通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞,分裂一次的细胞(1/2荧光强度),分裂两次的细胞(1/4荧光强度),分裂三次的细胞(1/8荧光强度)。Ø 


应用:

1. 肿瘤细胞增殖活性的检测

2. 目的基因瞬转/稳转细胞系的细胞增殖活性研究

3. 小分子化合物/多肽等药物筛选及功能安全性研究

4. 中药/中间体等药物筛选及功能安全性研究

5. 目的基因过表达的基因功能研究

6. 目的基因RNAi干扰的基因功能研究

microRNA过表达/干扰的调控机制研究


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