病毒滴度检测江苏谱新生物医药有限公司

技术服务详细描述

以病毒为载体的细胞治疗产品中，滴度是表示产品含量及病毒数量的指标。病毒滴度分为总颗粒数、基因组滴度、感染 性滴度、转导滴度等不同的类型。总颗粒数和基因组滴度表示病毒的物理数量，为物理滴度；感染性滴度和转导滴度表示有生物活性病毒的数量，为生物滴度。我司可提供总颗粒数和转导滴度的检测服务。
物理滴度（总颗粒数）：指物理性病毒颗粒的总数。
生物滴度（转导滴度）：转导滴度是指能有效地转导靶细胞并表达出转基因产物的病毒数量，是更能反映基因治疗产品有效成分的功能性含量指标。

检测特点
总颗粒数：
● 符合 GMP，FDA 21CFR Part 11 要求的检测设备
● 商品化检测试剂盒，结果稳定，质量可控
● 基于 HIV-I 型慢病毒的 p24 蛋白通用检测方法

转导滴度检测：
●  符合 GMP，FDA 21CFR Part 11 要求的检测设备
● 基于 293T、Jurkat 等细胞共培养后，进行分析
●  基因层面和蛋白层面多角度分析病毒的有效滴度

病毒滴度检测分类
物理滴度（p24）
● 样本来源：基于 HIV-1 型为骨架改造的慢病毒制品
● 检验方法：Elisa 法，试剂盒质控符合监管机构要求
● 定量范围：6.25~200pg/ml
● 质控要求：
   ◆ 标曲：R2>0.99
   ◆ 加标回收率：80~120%
● BSL-2 环境下全封闭操作，保证生物安全性

转导滴度
● 梯度稀释慢病毒制品与检测细胞（293T/Jurakt 细胞）共培养一段时间（通常 72~96h）后
   ◆ qPCR 法：细胞基因组提取后，进行 CAR 拷贝数检测
   ◆ FACS法：分析不同稀释度的慢病毒感染液的CAR阳性率
● 两者转导滴度的结果，可用来综合分析基因层面和蛋白层面病毒的有效滴度