5'-Race,3'-Race上海捷兰生物技术有限公司

技术服务信息

服务名称:5'-Race,3'-Race
服务类别:分子生物学服务 - 基因合成服务
价格:询价
允许参观:允许参与实验
所在区域:上海.上海
更新时间:2017/9/19 10:43:00
浏览人数:17023
诚信指数:471点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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生物在线声明:以上所展示的信息由企业自行提供,内容的真实性、准确性和合法性由发布企业负责。生物在线对此不承担任何保证责任。

供应商联系卡

上海捷兰生物技术有限公司
地址:
漕宝路500号4号楼4206室
邮编:
200233
电话:
021-54971019
传真:
联系人:
田先生
所在区域:
上海·上海
邮件:
公司展台:

技术服务详细描述

简介:cDNA末端的快速扩增(Rapid Amplification of cDNA Ends, RACE)法能有效的扩增出全长cDNA,这是一种基于mRNA反转录和PCR技术建立起来的、以部分的已知序列为起点、扩增未知序列、从而得到cDNA完

5'-RACE, 3'-RACE

 

★ 可以高灵敏度、高特异性地扩增稀有RNA样品或低丰度基因
★  在通过杂交、cDNA文库构建等方法筛选到一段非全长的cDNA序列后,我们可以通过RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) 实验进一步扩增此cDNA的5′末端或3′末端,从而得到全长的cDNA。
 
  服务内容

◇ Total RNA提取
使用AB公司TRIZOL,从各种材料中提取高质量的Total RNA。
◇ 3′RACE
使用TaKaRa 3′ -Full RACE Core Set Ver.2.0 (Code: D314) 进行3′RACE,试剂盒中独特设计的Adaptor和Nested PCR提高了PCR的特异性和灵敏度,从而轻松获得cDNA 3′端的序列。
◇ 5′RACE
使用TaKaRa 5′ RACE Kit ( Code: D315) 进行5′ RACE,试剂盒中的Tobacco Acid Pyrophosphatase能有效识别mRNA 5′ 末端的帽子位点,从而保证得到cDNA 5′ 端全长序列。

 
 ■ 服务说明
1. 样品:请尽量提供目的基因表达量高的单一样品。
1) 提取Total RNA的材料要新鲜,请您采样后立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂(如SampleProtector)。
2) Total RNA无降解,OD260/280=1.8 ~ 2.0。
3) 请提供尽量多的实验材料:3′ RACE Total RNA>15 μg;5′RACE Total RNA>25 μg。如果基因的含量较低或者未知序列较长,样品量需相应增加。
2. 已知序列:
1) 请提供大于200 bp的已知序列(请注明已知序列的5′ 端及3′端);如果已知序列比较短,建议先进行3′ RACE再进行5′ RACE,以提高实验的成功率。
2) 如果您有实验数据和参考文献等,也请发送给我们,这将会帮助我们更好地理解您的实验背景,有利于实验的顺利进行。
3) 我们会根据已知序列进行特异性扩增,如果得不到目的序列或为非目的基因的序列,我们将停止实验并收取实验成本费用。如果得到序列与您提供的序列有个别碱基不符,我们在征求您的意见后决定是否进行RACE实验。
4) 经验证,样品中基因含量低时,我们将与您沟通后,决定下一步实验使用的方法。
3. 由于mRNA存在个体和组织差异或基因的序列特殊,RACE的PCR产物测序有时会有个别碱基是套峰或测不通的情况,对未测通部分可继续进行克隆测序,最终提供两个质粒的测序结果,碱基的准确性由您自行判断。
4. 如果您的样品为原核生物,我们不保证调取的序列为3′ 和5′端全长序列。
 
注:
1. 对于样品中含量低的基因,我们可以使用特殊方法进行5′ RACE,请询价。
2. 如果根据已知序列进行特异性扩增,得不到目的序列或为非目的基因的序列,将收取500 元/样品的验证费用,Total RNA提取费用正常收取。
3. 如果RACE实验失败,将收取800 元/样品的RACE费用,Total RNA提取费用正常收取。
4. 实验周期指RACE扩增长度为基础长度时所需的时间;样品特殊、样品个数多和使用特殊方法时,实验周期顺延。
 
 ■ 提供结果

实验报告(包括PCR产物照片、测序结果等)、测序彩色波形图、测序方向图、碱基序列图、引物,如果产生克隆测序将提供测序用的质粒。

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