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细胞毒实验(MTT法)

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产品名称: 细胞毒实验(MTT法)

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编号

 实验项目

种类

收费标准(元)

周期

XB-1

细胞培养

原代培养

面议

面议

XB-2

传代培养

面议

面议

XB-3

细胞转染

瞬时转染

面议

面议

XB-4

稳定转染

面议

面议

XB-5

药物干扰

不同药物浓度/种类

面议

面议

XB-6

细胞侵染

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面议

面议

XB-7

细胞毒实验 

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面议

面议

XB-8

流式细胞术

单色标记

30元/样

5个工作日

XB-9

细胞相关检测

ELISA、Western Blot、流式细胞仪、免疫沉淀、激光共聚焦、免疫荧光标记检测等方法,检测相关指标,详见其他实验服务项目。

MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。

 MTT实验

          下图为用MTT法检测药效的折线图

 

样品要求及注意事项:

1低温运输:干冰运输:取对数生长期的细胞(细胞传代后细胞汇合度达到80%时),用胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来,低速离心1000rpm,5min;弃掉上清(胰蛋白酶及旧的培养液),加入适量配制好的冻存液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,血球计数板计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;在冻存管上标明细胞的名称、细胞代次、冻存时间及操作者;放4℃冰箱30min,-20℃30min到1h,-80℃过液,然后放入液氮罐; 

2常温运输:细胞贴壁覆盖瓶底面积达40%以上时,装满培养液,瓶口用封口膜封好,装入盒子,盒子里用泡沫或棉花塞满,让瓶子固定在盒子中。