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大规模生产中包涵体的复性与纯化

大规模生产中包涵体的复性与纯化

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    包涵体是外源基因在原核细胞中表达时,尤其在大肠杆菌中高效表达时,形成的由膜包裹的高密度、不溶性蛋白质颗粒。包涵体形成是比较复杂的,与胞质内蛋白质生成速率有关,还被认为与宿主菌的培养条件,如培养基成分、温度、pH值、离子强度等因素有关。细胞中的生物学活性蛋白质常以可融性或分子复合物的形式存在,功能性的蛋白质总是折叠成特定的三维结构型。包涵体内的蛋白是非折叠状态的聚集体,不具有生物学活性,因此要获得具有生物学活性的蛋白质必须将包涵体溶解,释放出其中的蛋白质,并进行蛋白质的复性。包涵体的主要成分就是表达产物,其可占据集体蛋白的40%~95%,此外,还含有宿主菌的外膜蛋白、RNA聚合酶、RNA、DNA、脂类及糖类物质,所以分离包涵体后,还要采用适当的方法(如色谱法)进行重组蛋白质的纯化。

    如上所述,包涵体的复性和纯化是以原核系统表达生产生物产品中的一个普遍而重要的问题,甚至是提升生物工程产业化水平的一个巨大瓶颈。本平台合作的主要技术专家多年来一直从事生物工程领域的研究与产业化工作,在解决此类问题上积累了丰富的实验经验,愿为广大同行提供卓有成效的技术服务。