病毒包装
产品名称: 病毒包装
英文名称: Cyagen Biosciences
产品编号:
产品价格: 询价
产品产地: null
品牌商标: null
更新时间: null
使用范围: null
- 联系人 :
- 地址 : 广州市黄埔区科学城绿地中央广场E栋501
- 邮编 :
- 所在区域 : 广东
- 电话 : 189****5885
- 传真 :
- 邮箱 : info@cyagen.com
Cyagen目前提供慢病毒包装服务。
一、慢病毒包装
赛业生物采用第3代重组慢病毒包装系统制备病毒颗粒。为了增加慢病毒的安全性能,病毒制备所必需的元件序列被拆分到4个质粒当中,分别是:
1)1个编码目的基因的慢病毒转移质粒。目的基因两侧各有一个LTR(long terminal repeat)序列,LTR序列促使目的基因整合到目的细胞基因组里。为了提高安全性能,转移质粒的3’ LTR缺失了部分序列,使得整合后的病毒基因组失去自我复制能力。
2)2个包装质粒。其中一个质粒编码Rev, 另外一个质粒编码Gag和Pol。
3)1个编码包膜蛋白的质粒。
利用上述质粒包装出来的重组慢病毒颗粒,被称为自我失活VSV-G假型慢病毒(self-inactivating VSV-G pseudotyped lentivirus)。
首先将转移质粒、包装质粒和包膜蛋白质粒转染到293T细胞。更换新鲜的培养基后,继续培养48~72小时。收集培养液,进行离心浓缩后,就可得到转导细胞级别的病毒颗粒。如果您想获得注射动物级别的超纯病毒颗粒,可以利用蔗糖超速离心进一步去除杂质,从而获得纯度更高的病毒颗粒。
CRISPR/Cas9慢病毒系统可对基因组的特定位点进行精确编辑。其原理是核酸内切酶Cas9蛋白通过导向性RNA(guide RNA,gRNA)识别特定基因组位点并对双链DNA进行切割,从而实现细胞水平单基因或多基因敲除。CRISPR慢病毒缩短实验周期的同时,更能快速得到实验结果,省时省力。