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Hairpin-it Real-Time PCR miRNAs定量检测方法

Hairpin-it Real-Time PCR miRNAs定量检测方法

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产品名称: Hairpin-it Real-Time PCR miRNAs定量检测方法

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上海吉玛制药技术有限公司
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吉玛公司 microRNAs 定量PCR检测解决方案

Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quantitation Assay原理

Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quatitation Assay 包括两步

1.      Stem-loop RT                                2. Real-time PCR

A.      Stem-loop RT primer 与miroRNA 分子的3’端结合,然后用逆转录酶将RNA逆转录成cDNA;

B.      将得到RT产物与miroRNA特异引物以及荧光标记的Molecular Beacon probes一起进行优化的real-time PCR反应。

Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quantitation Assay原理

 

Hairpin-it MicroRNAs Quantitation PCR的特点

  1. 高度特异,特异性的Stem-loop RT primer与miR-specific Molecular Beacon probe双重保证,确保反应不受其前体及其他因素干扰;序列高度同源的miRNAs也可精确区分;
  2. 超宽的定量线性范围和高度检测灵敏度,从几个拷贝一直到几万个拷贝,定量线性范围跨越7个数量级;
  3. 样品消耗量少,仅需1-10ng total RNA;
  4. 适用的样品范围广,total RNA、细胞裂解物以及纯化的RNA都可以用于qRT-PCR 的模板,即使基因组DNA的污染也不会干扰miRNA的定量;
  5. 金牌质量的miRNA标准合成物,即可精确用来作标准曲线绝对定量之用,又可用来作相对定量的阳性对照
  6. 操作快速简单,可实现RT与PCR反应一步完成;
  7. 重复性好,经过吉玛公司经验丰富的技术人员严格的质量检验。

Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quantitation Kit

 

 

 

目录号

规格

价格

QPM-010

100 rxns

¥1,000

QPM-011

200rxns

¥1,600

QPM-012

300rxns

¥2,500

QPM-013

500 rxns

¥3,000

 

产品特点

Ø 高度特异性的miRNA Hairpin primer;

Ø 只对成熟MicroRNAs进行定量,不受其前体干扰;序列高度同源的miRNAs也可精确区分;

Ø 灵敏度极高,仅需1-10ng的total RNA或同等物;

Ø 超宽的定量线性范围,可跨越7个数量级,从几个拷贝一直到几百万个拷贝;

Ø 可实现对每个细胞所含目标miRNA分子进行准确定量;

Ø 试剂盒内含合成的miRNA标准品一支。

 

适用的荧光定量PCR仪器

   ABI PRISM 7000/7300/7500/7900

   MJ-opticon、Opticon2及Chromo4 系列、MX3000p/4000

   Bio-Rad IQ系列、Light Cycler、Rotogene3000、FTC-2000

  

试剂盒组成(40µl×100 rxns

 


Real-time PCR Master Mix(5×)*      1ml×1支

miRNA Hairpin-primer Set(10µM)   100µl×1支

miRNA RT primer(10µM)           15µl×1支

Taq DNA polymerase (5U/µl)        50µl×1支

Synthetic miR-16 Standard                   1支

1X RNA Dilution buffer                1ml×2支

 


*内含dNTP Mixture,Mg2,SYBR Green1等。

 

试剂盒的保存

-20℃ 避光保存,避免反复冻融。保质期6个月。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Regularly Stored microRNAs qPCR Quantification Kits

Assay Name

Mature miRNA

Sequence

Human

Mouse

Rat

*价格Quantitation Kit

h-let-7a

ugagguaguagguuguauaguu

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-let-7b

ugagguaguagguugugugguu

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-let-7d

agagguaguagguugcauagu

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-let-7e

ugagguaggagguuguauagu

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-let-7g

ugagguaguaguuuguacagu

Yes

Yes

 

¥1,000

h-let-7i

ugagguaguaguuugugcu

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-9

ucuuugguuaucuagcuguauga

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-9*

uaaagcuagauaaccgaaagu

Yes

Yes

 

¥1,000

h-miR-10a

uacccuguagauccgaauuugug

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-15a

uagcagcacauaaugguuugug

Yes

Yes

 

¥1,000

h-miR-15b

uagcagcacaucaugguuuaca

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-16

uagcagcacguaaauauuggcg

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-17-3p

acugcagugaaggcacuugu

Yes

 

 

¥1,000

h-miR-17-5p

caaagugcuuacagugcagguagu

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-19a

ugugcaaaucuaugcaaaacuga

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-20

uaaagugcuuauagugcaggua

Yes

 

 

¥1,000

h-miR-21

uagcuuaucagacugauguuga

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-23a

aucacauugccagggauuucc

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-23b

aucacauugccagggauuaccac

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-25

cauugcacuugucucggucuga

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-26a

uucaaguaauccaggauaggcu

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-26b

uucaaguaauucaggauaggu

Yes

 

 

¥1,000

h-miR-27a

uucacaguggcuaaguuccgcc

Yes

 

 

¥1,000

h-miR-27b

uucacaguggcuaaguucug

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-28

aaggagcucacagucuauugag

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-29a

cuagcaccaucugaaaucgguu

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-29b

uagcaccauuugaaaucagu

Yes

 

 

¥1,000

h-miR-29c

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Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-30a-3p

cuuucagucggauguuugcagc

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-30b

uguaaacauccuacacucagc

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-30c

uguaaacauccuacacucucagc

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-30d

uguaaacauccccgacuggaag

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-30b

uguaaacauccuacacucagc

Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-30e

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Yes

Yes

Yes

¥1,000

h-miR-31

ggcaagaugcuggcauagcug

Yes

 

 

¥1,000

 

*注:该价格为Quantitation Kit 100rxns规格试剂盒报价,其他规格试剂盒与Hairpin-itTM miR-16 qPCR Quantitation Kit相应规格试剂盒价格相同;

由于MicroRNAs数量众多,吉玛公司可以为其他miRNAs序列提供Hairpin-itTM miRNAs Quantitation Assay定制服务, 具体定制流程请咨询吉玛公司