DNA CpG甲基化检测—HRM法北京康为世纪生物科技有限公司

　　DNA甲基化是一种表观遗传修饰，它是由DNA甲基转移酶（DNA methyl-transferase, Dnmt）催化S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体，将胞嘧***转变为5-甲基胞嘧***（mC）的一种反应，在真核生物DNA中，5-甲基胞嘧***是唯一存在的化学性修饰碱基。CG二核苷酸是最主要的甲基化位点，它在基因组中呈不均匀分布，存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的区域，在哺乳动物中mC约占C总量的2－7％。一般说来，DNA的甲基化会抑制基因的表达。DNA的甲基化对维持染色体的结构、X染色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起重要的作用。
　　HRM法原理：用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA，所有未发生甲基化的胞嘧***（C）被转化为尿嘧***（U）而甲基化的胞嘧***则不变。在非CpG岛位置设计一对针对经亚硫酸氢钠处理后DNA 链的引物，这对引物中间包含有意义的甲基化CpG岛，一旦这些CpG岛发生甲基化，胞嘧***（C）不发生变化，而未甲基化的胞嘧***（C）转变成胸腺嘧***（T），样品中的 GC 含量发生了变化，最终被转化成了熔解曲线 Tm 值之间的差异。

服务价格

服务内容
　　1. 基因组DNA的Bisulfite转化。
　　2. HRM(High Resolution Melting)法(Real-Time PCR)。

样品要求
　　·若提供基因组DNA，需≥2ug。
　　·若提供的材料为新鲜组织、血液、细胞等生物材料，请提供足够提取2ug以上基因DNA的材料量。
　　·基于所选择的DNA甲基化检测方法，请提供相应的引物或引物序列。

终产品
　　·Bisulfite处理的基因组DNA；
　　·实验报告(包括扩增曲线、HRM曲线)。

服务说明
　　·在基于Bisulfite 转化的DNA甲基化检测的方法中，引物是决定实验成败的关键因素，且视期望检测的目的基因片段的不同，适宜引物的存在与否有较大的不确定性，请尽量采用其可行性经过验证的引物，如因引物等非本公司原因导致某实验步骤失败，使服务提前终止，已启动的实验项目正常收费。若需DNA甲基化检测用引物设计服务，价格另议。