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百萤课堂之细胞信号传导

作者:西安百萤生物科技有限公司 2023-12-27T00:00 (访问量:17790)

   

     百萤小课堂又给大家分享知识啦!今天给大家讲解的内容是关于细胞信号传导。

 

    在生物学中,细胞信号传导是控制基本和复杂细胞过程的通信网络。根据信号的性质,它可以分为生物化学信号或机械信号。生化信号由蛋白质、脂质、离子或激素等生化分子产生。对这些生化试剂的检测可以揭示该特定类型信号传导途径的状态。

    

   信号网络的破坏通常会导致癌症、免疫疾病和代谢紊乱等疾病。通过了解信号通路,研究人员和临床医生也许能够有效且高效的治疗疾病。AAT Bioquest提供广泛的检测方法,对涉及细胞信号传导途径的各种酶、蛋白质或小分子进行经济有效的分析。灵敏度和重现性测量磷酸化、甲基化和乙酰化等活性。

 

1.二磷酸腺苷检测

 

   二磷酸腺苷(ADP)是一种重要的有机分子,在细胞代谢中发挥着重要作用。它是 ATP 去磷酸化的产物,ATP 去磷酸化是活细胞中能量转移所必需的关键反应,并且可以通过再磷酸化再循环回 ATP。ADP 和 ATP 的这种相互转化主要通过 ATP 酶(例如磷酸酶、磷酸化酶和激酶)在线粒体和叶绿体中发生。ADP 储存在血小板内的致密体中。当血小板被激活时,ADP 被释放,与嘌呤能受体家族相互作用,从而调节细胞功能。

   PhosphoWorks™ 荧光 ADP 测定提供了一种监测 ADP 形成的灵敏方法。在这种酶偶联测定中,ADP 的形成是通过监测激酶活性(由于它们的比例关系)来测量的。

图1.ADP 剂量反应通过 PhosphoWorks™ 荧光 ADP 检测试剂盒(货号 21655)在实心黑色 384 孔板中使用 Gemini 荧光酶标仪(Molecular Devices)进行测量。孵育 15、30 分钟和 1 小时即可检测低至 0.3 µM ADP(Z' 系数 =0.65)。

表一.用于检测ADP活性、形成或消耗的生化分析

 

2.三磷酸腺苷检测

 

   三磷酸腺苷(ATP)是一种复杂的有机分子,参与细胞能量生成、代谢调节和细胞信号传导。它作为主要能量存在于所有生物体中,并且在没有活生物体的情况下会迅速降解。因此,ATP测定是一种有用的工具,可用于各种研究应用,以识别活生物体。常见应用包括细胞活力和细胞毒性、表面细菌的检测、水中细菌的检测、培养中的体细胞以及食品质量和污染检测等。

   我们的PhosphoWorks发光法ATP检测提供了一种快速、简单的生物发光法,可用于通过ATP检测来确定哺乳动物细胞的细胞活力、细胞毒性和增殖。

图2.使用PhosphoWorks发光法ATP检测试剂盒(货号21610)在96孔板上使用NOVOstar酶标仪(BMG Labtech)检测ATP计量反应。

 

表二.用于检测ATP活性、形成或消耗的试剂

 

 

3.环磷酸腺苷检测

 

   环磷酸腺苷 (cAMP) 是许多生物途径中重要的第二信使。它在许多生物体中用于细胞内信号转导,传递 cAMP 依赖性途径,并参与蛋白激酶的激活和离子通道调节。cAMP 源自 ATP,由质膜结合的腺苷酸环化酶合成,该酶与跨膜受体偶联。腺苷酸环化酶的激活是由一系列信号分子启动的。这些分子与GPCR等受体相互作用,启动腺苷酸环化酶活性并增加细胞内 cAMP 水平。cAMP 激活 cAMP 依赖性蛋白激酶,负责磷酸化特定底物蛋白。cAMP 活性的测定可用于评估受体激活、受体表征和受体-配体鉴定的功能测定。

图3.使用Screen Quest比色法ELISA cAMP检测试剂盒(Cat#36370)在带有SpectraMax酶标仪的透明96孔板中检测cAMP计量反应。

 

表3.用于检测G蛋白偶联受体系统中腺苷酸环化酶活性

 

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