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精品推荐 | 仅需5min!高效完成反转录实验

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2023-08-02T00:00 (访问量:12099)

精品推荐 | 仅需5min!高效完成反转录实验


Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit是基于Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit开发的快速逆转录试剂盒,适用于PCR扩增以及RT-qPCR实验。与Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit相比,具有稳定的检出率、特异性、产量保证,且反转录总时长最快可低于6分钟,大大缩短了实验时间。

 


 


产品名称


Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit


 

 


产品特点


快速反转:最快5分钟左右即可完成第一链cDNA合成;

检出率高:10 pg-1 ug的RNA检出率;

高效合成:合成效率媲美进口,最长可合成14kb大小的片段;

应用广泛:可用于下游PCR或qPCR,亦可调整引物保证small RNA等样本的反转录;


示踪便利:示踪版包含无干扰、可视化蓝色示踪染料,提醒加样进度;


稳定性好:试剂盒可4℃存放14天,反转产物可37℃保存7天,反复冻融50次。

 

 

 


性能展示


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1

快速反转

 

 

 

图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES进行逆转录,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,不同反转录时间处理的Ct值差值在0.2之内。说明产品可在5分钟内完成反转录,反转效果和长时间反转效果持平。

 


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2

灵敏度高,最低可至10 pg

 

 

 

图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES进行逆转录,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,RNA 投入量为10 pg-1 μg时,11149ES均可反转成功,保证定量结果。

 

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3

扩增性能好,最长扩增14 kb片段

 

 

 

图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES进行反转录,将得到的cDNA进行PCR检测。结果显示,11149ES能够满足合成1 kb-14 kb长度的cDNA, 后续PCR有一定的试用场景。若需要直接反转出10kb以上的片段,建议延长反转录时间至20-30分钟,以保证最终片段的获取。

 

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4

示踪便利

 

 

 

图. 测试显示,加入一定量的示踪剂成分,未影响产品的反转录效率,Ct值、熔解曲线峰值和TM值未受到负面影响。

 

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5

稳定性好

 

 

 

图. 以293T细胞总RNA为模板,使用-20℃、4℃、25℃、37℃下分别储存1、3、5、7天的11149ES进行逆转录,对得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,不同温度不同时间存放的试剂盒定量结果的△Ct均在0.3范围内(△Ct于±0.5以内,认为两者差异可忽略不计),具有良好的稳定性。

 

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6

反转录效率比对

 

 

 

图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES、进口A品牌进行逆转录,其中11149ES不进行gDNA去除步骤,将得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,进口A品牌反转时间为13分钟, 11149ES反转时间为5分钟,不同产物定量显示,11149ES的Ct更小或者接近进口竞品,说明11149ES 5分钟反转效率优于或近似进口A品牌的反转录效率。

 

 

图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES、进口B品牌进行逆转录,其中11149ES不进行gDNA去除步骤,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,进口B品牌反转时间为20分钟,11149ES反转时间为5分钟,不同量底物定量显示,11149ES的Ct更小或者接近进口B品牌,说明11149ES 5分钟反转效率优于或近似进口B品牌的反转录效率。

 

 

 


客户反馈体验


 

样本来源:菊花叶片

客户评价:与某进口品牌效果相似,扩增常规大小的片段效果不错。

 

样本来源:果*叶片

客户评价:蓝色很好看

 

样本来源:水稻

客户评价:与其他反转录试剂盒相比,节省加样时间,节省反转录反应时间(其他试剂盒需要15+2 min,本试剂盒只需5 min),后续基因克隆DNA电泳结果证明,本试剂盒反转效率更高,条带更亮,所以会更节省PCR使用试剂,节省成本。

 

 

 


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