AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：RlncRNA AFAP1-AS1 / microRNA-195 / E2F3轴对HSCR的致病性。
长链非编码RNA（lncRNA）已与几种人类疾病有关。然而，尚不清楚它们是否与大隐身病（HSCR）的肠神经嵴干细胞（ENCSC）表型有关。因此，我们设计本研究以探讨AFAP1-AS1对HSCR的致病性。进行了微阵列分析和生物信息学工具，以筛选出HSCR患者的lncRNA和microRNA（miRNA）差异。应用小干扰RNA转染在ENCSC中进行功能实验。通过CCK-8，EdU，transwell测定法和流式细胞术分别检测细胞活性。最后，进行抢救实验以检查AFAP1-AS1和miR-195以及miR-195和E2F转录因子3（E2F3）的功能。HSCR患者的AFAP1-AS1降低。同时，敲低AFAP1-AS1降低了细胞的迁移和增殖能力，促进了细胞凋亡以及G0 / G1期阻滞。当miR-195上调时，E2F3减少，而AFAP1-AS1抑制作用降低了其与miR-195的结合能力。总之，AFAP1-AS1沉默通过与miR-195相互作用以改变E2F3表达而充当内源RNA，从而赋予ENCSC活性以抑制作用并促进HSCR进程。
然后将细胞悬液以5×103细胞/孔的浓度接种到96孔板中，并在不同时间点（0时）向每个孔中补充10μLCCK-8溶液。2 h后，在酶标仪（450 nm）下记录每个孔的光密度（OD）值，并绘制生长曲线。
实验结果表明，敲低AFAP1-AS1后，ENCSCs在450 nm的OD值降低，EdU阳性细胞的数量也明显减少。 在分化培养基中处理后，AFAP1-AS1沉默降低了GFAP阳性细胞，这表明AFAP1-AS1的低表达可以抑制ENCSCs的分化。
鸣谢：Weikang Pan, et al. Exp Physiol. 2020 Sep 22.