dib® 2×Taq Master Mix
产品名称： dib® 2×Taq Master Mix
英文名称： dib® 2×Taq Master Mix
产品编号： PE012
产品价格： 0
产品产地： 东莞
品牌商标： DIB
更新时间： null
使用范围： null
广州帝博生物科技有限公司
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■ 产品说明：
本制品是将PCR反应所需的Taq酶、dNTPs、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq Master Mix专为常规PCR扩增反应优化，扩增长度可达8kb，能对4kb及其以下长度的片段进行高效地扩增。使用时只需再加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，大大地简化了操作过程，减少了PCR操作过程中的污染。2 × Taq Master Mix提供普通型/快速上样型两种形式供您选择。经测试，染料的加入不影响PCR反应，在PCR反应完成后可直接电泳，节省时间。使用本试剂扩增得到的PCR产物3′端有一突出"A"碱基，可直接克隆于T载体中。
■ 产品特点：
高效：以λDNA为模板，扩增长度可达8kb，能高效扩增≤4kb片段
灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
稳定：反复冻融几十次，4℃放置30天，室温放置一周后，扩增性能不受影响。
快捷：PCR反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配制。
便利：PCR反应后可直接电泳（含染料形式）。
■ 产品用途：
1）常规PCR鉴定；
2）小片段目标基因克隆；
3）平端PCR产物加A。
■ 保存：
-20 ℃,保质期2年
■ 产品包装（A包装）：
| 产品组成 体积 |
| 2×Taq Master Mix 1ml×5 PCR Mix 50μl |
■ 质量保证：
经检测无外源核酸酶残留，qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
■ 操作方法：
常用反应体系（50μl）：
| 2 × Taq Master Mix* | 25μl |
| 上游引物 | 0.2-1.0μM（终浓度） |
| 下游引物 | 0.2-1.0μM（终浓度） |
| 模板 Taq | 1-50ng（质粒） |
| 10ng-1μg（基因组） 0.25μl（1.25U） | |
| ddH2O | 至50μl |
常用PCR循环：
当扩增片段＜3K；
| 94℃， | 1分钟30秒 |
 94℃，20秒 | |
| 30次循环： | 50～60℃，20秒 |
| 72℃，1kb/60秒 | |
| 72℃ | 5分钟 |
| 4℃ | 保温 |
| 94℃， | 5分钟 |
| 30次循环： |  94℃，5秒 |
| 68℃，1kb/60秒 | |
| 72℃ | 5分钟 |
| 4℃ | 保温 |
注意事项
1）需要溶解完全后使用，防止离子浓度不均匀。
2）菌液PCR时预变性时间≥5min，更有利于破壁。
3）应根据实验目的选择合适的循环数，循环数过少，会造成扩增量不足；循环数过多，扩增量增加，但突变率也会增加，并造成非特异性扩增。
4）根据引物Tm值设置合适退火温度，退火温度过低，会造成非特性扩增；过高可能扩增不到。