Lowry 法蛋白浓度测定试剂盒说明书
货号：PC0030
规格：1000T(微孔)
保存：BSA 蛋白标准品4℃保存有效期至少3个月，-20℃保存有效期至少一年，其他试剂室温保存有效期至
少一年。试剂开封使用后请及时密闭保存，Folin 酚乙试剂颜色变成深绿色即失效。
产品组成：
产品简介：
Folin-酚试剂法包括两步反应：第一步是在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物；第二步
是此络合物将Folin 试剂还原，产生深蓝色，颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5～100μg/ml 蛋白质。
Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起，因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干
扰作用。此外，不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。
操作说明：
1.根据需要量，取适量Folin 酚甲试剂A 和B 按50:1 混合，混合后有效期为24 小时，过期失效。
2.根据需要量，取适量BSA 标准品用PBS 稀释稀释10 倍至浓度0.5mg/ml。
若采用酶标仪法(96孔)
3.将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul 加到96 孔板中，加PBS 补足到20ul。
4.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度)，加20ul 到96 孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，
标准线前面的点误差比较大，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2 后。
5.将配好的Folin 酚甲试剂每孔加入200ul，轻轻震动，混匀，室温放置10 分钟。
6.各孔加入20 微升Folin 酚乙试剂，迅速混匀，37℃放置30 分钟。用酶标仪测定A650 计算蛋白浓度。
若采用分光光度计法（接上述步骤2）
3.取八支（或者更多）5ml离心管，标号，按下表加入试剂。
4.混匀，37℃放置30 分钟。分光光度计测定A650 计算蛋白浓度。
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离心管号 1 2 3 4 5 6 7（样品管1） 8（样品管2） 9（样品管3）
标准蛋白BSA
0 40ul 80ul 120ul 160ul 200ul 200ul 适当稀
释的样品1
200ul 适当稀释的样品2
……
PBS 200ul 160ul 120ul 80ul 40ul 0 0 0 0
Folin 酚甲试剂
2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml
混匀，室温放置10 分钟
Folin 酚乙试剂
200ul 200ul 200ul 200ul 200ul 200ul 200ul 200ul 200ul