兔子转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒
产品名称: 兔子转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒
英文名称: rabbit Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit
产品编号: WT4325
产品价格: 0
产品产地: 进口/国产
品牌商标: 进口原装/国产
更新时间: null
使用范围: null
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兔子转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒规格: 48T/96T
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说明书以人B因子(BF) Elisa试剂盒为例:
人B因子(BF)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
药品名称:
通用名:人B因子(BF)酶联免疫分析试剂盒
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆、或其它组织液中B因子(BF)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人B因子(BF)水平。用纯化的抗-BF抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人B因子(BF),再与HRP标记的羊抗人抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人B因子(BF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人B因子(BF)浓度。
试剂盒组成
1 | 25倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(18μg/ml) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 20ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行实验。
2.待检血清1:20稀释:具体为190μl样品稀释液中加10μl待检血清,混匀即可)
3.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
4.可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为(12μg/ ml,8μg/ ml ,4μg/ ml,2μg/ ml, 1μg/ ml)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将25倍浓缩洗涤液用蒸馏水25倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以TUNEology 波长可调检测卡盒-->