产品说明：

    病毒RNA提取试剂盒II型是I型（沉淀法）基础上利用吸附柱纯化RNA样品的试剂盒。适用于血清（血浆）等液体样品中微量病毒RNA的提取。

    适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。

    提取的RNA可用于RT-PCR和qRT-PCR。

操作步骤：（样品裂解，样品纯化，RNA收集）

一：样品裂解

    1. 在 1.5 mL 离心管中加入 0.1-0.2 mL 液体病毒样品。如果病毒需要富集，可以将 1.5 mL 液体在 4℃下 24，000 g 冷冻离心 60 分钟，移弃 1.3 mL后继续操作。

    2. 加入 0.6 mL裂解液VR，振荡 30 s混匀后室温放置 10 分钟。

    注意：裂解液VR 在 4℃放置后可能会产生沉淀，使用前请置于 65℃水浴使 沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。

二：样品纯化

    1. 将溶液全部转移到RNA纯化柱中，室温放置 2 分钟。

    2.  13000 g 室温离心 1 分钟，弃收集管中穿透液。

    3. 在纯化柱中加入0.5mL RNA洗涤液，室温12,000rpm离心半分钟，弃穿透液。

三：RNA收集

    1. 将结合有RNA的纯化柱12,000rpm 离心 1min，甩干乙醇。（乙醇的残留将会降低洗脱效果和影响下游实验，或者适当延长离心时间，将有助于乙醇的去除）

    2. 弃收集管，将柱芯转移到1.5mL的RNase-free离心管中，加入30-50uL DNase＆RNase-free水，室温放置 1分钟，12,000 rpm离心1分钟洗脱RNA。得到的RNA可直接用于后续实验或者 -80℃ 存放。

    3. 如果要提高 RNA 产量，加入30-50uL DNase＆RNase-free水重复洗脱一次，合并两次穿透液；如果要提高 RNA 浓度，使用第一次的洗脱液加回到纯化柱中重复洗脱。

四：疑难问题