组蛋白琥珀酰化（Histone Succinylation, Ksucc）是一种新型、重要的表观遗传修饰，其在染色质重塑、基因转录调控、代谢调节以及疾病机制中发挥关键作用。由于其存在量低、动态变化快，检测和定量琥珀酰化成为分子生物学和蛋白质组学研究的重要环节。

一、组蛋白琥珀酰化检测的科学基础

1、化学特征

组蛋白琥珀酰化是赖氨酸残基上形成的可逆性修饰，带有负电荷和较大空间体积。相比乙酰化，它能显著改变组蛋白与DNA的相互作用，导致染色质松弛和基因表达变化。

2、代谢依赖性

琥珀酰化依赖于琥珀酰辅酶A（Succinyl-CoA），主要来源于线粒体三羧酸循环（TCA cycle）。因此，Ksucc水平不仅反映表观遗传状态，还能间接反映细胞代谢活性，为研究代谢相关疾病提供新思路。

3、生物学意义

琥珀酰化参与染色质重构、DNA修复、细胞周期调控及应激响应，其异常变化与肿瘤、代谢性疾病以及神经退行性疾病相关，成为潜在的疾病生物标志物。

二、组蛋白琥珀酰化的检测策略

检测组蛋白琥珀酰化通常依赖高灵敏的质谱技术，结合免疫学方法，实现低丰度修饰的精确识别和定量分析。主要检测策略如下：

1、蛋白提取与肽段制备

组蛋白需从细胞或组织中提取后进行酶切消化，常用方法包括：

• 酸提取或盐提取：快速分离组蛋白，保持修饰稳定性。
• 蛋白酶消化：常用胰蛋白酶或Lys-C将组蛋白切割成适合质谱分析的肽段。
• 抑制酶活：加入HDAC抑制剂防止修饰在提取过程中被去除。

2、免疫学检测方法

（1）Western Blot

利用特异性抗Ksucc抗体，可快速检测组蛋白琥珀酰化的存在与整体水平变化。适合初步筛选，但难以定位具体修饰位点。

（2）免疫荧光染色（IF）

可观察细胞内组蛋白琥珀酰化的空间分布，辅助研究染色质结构和基因活性区域，但定量精度有限。

（3）免疫沉淀（IP）结合质谱

通过Ksucc抗体富集组蛋白或肽段，再结合质谱检测，可以精确识别修饰位点和相对丰度，是目前研究的主流方法。

3、质谱检测方法

质谱是组蛋白琥珀酰化分析的核心工具，具体流程包括：

（1）液相色谱分离（LC）：将复杂肽段样品分离，提高质谱检测灵敏度。

（2）串联质谱分析（MS/MS）：测定肽段的质量-电荷比（m/z），并通过碎片离子信息定位琥珀酰化位点。

（3）定量分析：

• Label-free：通过肽段信号强度进行相对定量。
• 同位素标记（SILAC、TMT/iTRAQ）：实现多样本定量比较，适合高通量研究。

（4）数据处理：利用MaxQuant、Proteome Discoverer等软件，进行肽段匹配、修饰定位和定量统计，确保结果高准确性和可重复性。

（1）单细胞质谱：实现对Ksucc在单个细胞中的定量分析，揭示细胞异质性。

（2）空间组学方法：结合质谱成像或免疫荧光，分析组织或肿瘤微环境中Ksucc分布，为临床研究提供空间信息。

三、组蛋白琥珀酰化检测的研究应用

1、表观遗传调控

通过检测不同条件或细胞类型下的Ksucc水平，科研人员可以研究其在基因表达、染色质重塑和细胞命运决定中的作用。

2、代谢相关疾病研究

琥珀酰化与TCA循环代谢紧密相关，Ksucc检测可帮助解析肿瘤代谢重编程、糖尿病及肥胖等疾病机制。

3、药物作用机制分析

药物对组蛋白修饰的影响是药物研发的重要指标，通过Ksucc检测评估药物对染色质状态和基因表达的调控作用，为精准药物开发提供依据。

4、生物标志物发现

特定病理状态下Ksucc修饰位点异常，可用于疾病早期诊断、疗效监测及分型研究。质谱检测提供高通量、精准数据支持。

检测组蛋白琥珀酰化是理解表观遗传调控、细胞代谢及疾病机制的重要手段。通过免疫学方法和高分辨质谱技术，科研人员可以精准识别和定量琥珀酰化位点。百泰派克生物科技凭借先进质谱平台、全流程定制服务及专业数据解析能力，为科研人员提供高质量的Ksucc检测方案，助力科研突破和疾病机制研究。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

>>点击了解更多优质服务项目