活组织冻存试剂盒-常用生化试剂-试剂-生物在线
上海慧存医疗科技有限公司
活组织冻存试剂盒

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产品名称: 活组织冻存试剂盒

英文名称: LiveTissue

产品编号: LT1601

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产品产地: 中国

品牌商标: LiveTissue

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上海慧存医疗科技有限公司
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推荐理由:

  • 复苏后组织活性可保存80%以上,可用于构建PDX/PDC模型,药敏试验及单细胞测序等,使组织得到高效应用;
  • 即用即取,无需配制;
  • 质量稳定可靠,批间次差异小;
  • 该试剂盒组织保存技术已获得专利证书
活肿瘤组织冻存试剂盒(LT2601-1) 组成部分:
5ml 冻存管 3 支,组织支架 3 片
玻璃化液:V1—10ml;V2—10ml;V3—10ml
组织冻存流程:
清洗、处理组织→玻璃化液 1、2、3→液氮玻璃化→储存
必备材料:
  1. 组织切片模具(LT2603)1 个及配套刀片(LT2604)3~5 片
  2. 无菌纱布 1 片
  3. 秒表或计时器 1 个
  4. 液氮 250ml 及液氮杯 1 个
  5. 直头镊小号(11 厘米左右)和中号(16 厘米左右)各 1 把
  6. 2~8℃冰箱
  7. 60mm 或 100mm 培养皿若干
  8. 基础培养基
可能需要的材料:
  1. 眼科剪和眼科镊
  2. 含双抗的生理盐水或PBS 缓冲液
操作步骤:
a.检查组织,确定待处理和冻存的部位,清除坏死、多余组织及残余的血块、粘膜。如有血液,应用生理盐水或 PBS 冲洗净,如标本为结直肠癌或皮肤癌,应充分冲洗以避免可能的微生物污染。
b.使用 LT2603 和 LT2604 将组织切成 1mm 厚的组织片,若某些组织松散呈糜烂状切成1mm 不容易保持形态完整,可切成 2mm 厚。
c.选取形态较完整的组织片浸入V1 溶液中处理 8min,在 4min 时上下轻轻颠倒混匀 3~5次。
d.将 V1 溶液倒入培养皿中,再将组织片轻柔移入 V2 溶液中处理 8min,在 4min 时上下轻轻颠倒混匀 3~5次。
e.将 V2 溶液倒入培养皿中,再将组织片轻柔移入 V3 溶液中处理 10min,在 5min 时上下轻轻颠倒混匀 3~5次。
注意:V3 溶液处理结束后,组织片沉降于管底或半悬浮于 V3 溶液中。如果组织漂浮于 V3 液面上,说明组织片中非细胞成分较多,可在 V1、V2、V3 处理期间增加颠倒混匀的次数。
f.将 V3 溶液倒入培养皿中,将组织支架平铺于无菌纱布上。
g.将组织片移到组织支架上,平铺组织片,避免重叠和折叠,在纱布上吸去多余液体。
h.将组织支架快速浸入液氮,静置至少 5min。
注意:在组织支架移入组织冻存管前,检查组织切片是否透明,透明的组织切片意味着组织切片成功被玻璃化。
i.拧开冻存管盖,用中号直头镊夹紧冻存管半进入液氮预冷 10 秒后,快速将组织支架移入冻存管内,旋上管盖。
j.将冻存管移入液氮罐中长期保存。