酵母菌落PCR试剂盒（快速扩增酵母阳性克隆试剂盒）
产品名称： 酵母菌落PCR试剂盒（快速扩增酵母阳性克隆试剂盒）
英文名称： 快速扩增酵母阳性克隆试剂盒
产品编号： RY8001
产品价格： null
产品产地： 南京
品牌商标： 南京瑞源生物技术有限公司
更新时间： 2024-02-20T14:16:29
使用范围： null
- 联系人 : 小瑞
- 地址 : 南京市栖霞区仙林街道齐民西路6号南京仙林智谷3C栋10层1001室
- 邮编 :
- 所在区域 : 江苏省
- 电话 : 199****3638
- 传真 :
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▼ 产品简介
本试剂盒含有绿色染料，可在反应结束后直接进行电泳，能够快速扩增酵母中重组质粒目的基因片段，省时省力。Yeast lysis buffer用于破坏酵母的细胞壁；2 × Yeast PCR mix含PCR buffer，dNTPs，MgCl2，热启动快速Taq酶，客户只需加入引物和模板/酵母菌落即可进行扩增，减少移液操作，提高了稳定性，且2×Yeast PCR mix中含有保护剂，反复冻融后仍可保持稳定性。PCR产物的3’端带有A，可直接用于TA克隆。
▼ 产品编号
CAT：RY8001
规格：80T / 320T
▼ 保存条件
-20 ℃保存，有效期1年
▼ 产品组分
| 组成成分 | 单位及状态 | 规格 |
| Yeast lysis buffer | 0.4ml/支，液体 | 0.4ml |
| 2 × Yeast PCR mix | 1ml/支，液体 | 1ml |
| 说明书 | 份，纸质版 |
▼ 产品优势
▼ 实验指南
1、吸取3-3.5 μl Yeast lysis buffer到PCR管中，用无菌枪头或牙签蘸取适量酵母菌至PCR管中。
2、吸打(搅拌)混匀后，置于98 ℃反应10-20 min。
3、再准备一支无菌PCR管，按下表配制反应体系。
PCR反应体系：
| 2×Yeast PCR mix | 25 μl |
| primer F（10 μM） | 2 μl |
| primer R（10 μM） | 2 μl |
| template* | 1 μl |
| ddH2O | to 50 μl |
* 步骤2的反应液短暂离心,混匀后吸取1 μl作为模板
PCR反应条件：
| 反应温度 95 ℃ | 反应时间 | 循环 |
| 95 ℃ | 3 min | 1 |
| 95 ℃ | 15 sec | 30-32 |
| Tm | 15 sec | 30-32 |
| 72 ℃ | 15 sec /kb | 30-32 |
| 72 ℃ | 5 min | 1 |
| 4 ℃ | ∞ | 1 |
* 该退火温度根据引物的Tm值进行调整，一般设置Tm -5 ℃
▼案例展示
酵母菌株案例：
图注：从SD/-Leu-Trp-His-Ade培养基中挑取酵母菌落直接进行酵母菌落PCR
枯草芽孢杆菌案例：
图注：枯草芽孢杆菌是一款革兰氏阳性菌，通常需要提取DNA后进行扩增，客户用我们的试剂一步直接扩增
生防菌案例：
图注：扩增各种真菌，以ITS为引物，效果是显著