内参的使用――WB过程监测以及目的蛋白定量的标准！
在WB试验中中，最重要和最不可或缺的对照就是内参照（Loading Control，Internal Control）。内参照的使用有两个方面的作用：
1、是检测整个WB实验过程及体系是否正常工作，如果一个实验连内参照都做不出阳性结果的话（在内参抗体有效的情况下），那么这个体系就是存在问题的了
2、半定量的标准：内参一般选择的管家基因编码表达的蛋白，在很多组织和细胞中中都是稳定表达的，因此可以作为检测靶蛋白表达量的标准。
Rabbit polyclonal to beta actin (ab8227) at 1/5000.
Lane 1: HeLa whole cell extract (20ug);
Lane 2: yeast cell extract (20ug)
Lane 3: mouse brain tissue lysate (20ug).
Developed using Goat anti-rabbit IgG (HRP) (ab6721) at 1/2000.
Don’t be a cowboy, use a Loading Control!
WB常用内参及其技术参数：
| 内参名称 | 分子量大小 | 适用范围 |
| beta-actin | 43kDa | 胞浆和全细胞 |
| GAPDH | 30-40kDa | 胞浆和全细胞 |
| Tubulin | 55kDa | 胞浆和全细胞 |
| VCDA1/Porin | 31kDa | 线粒体 |
| COXIV | 16kDa | 线粒体 |
| TBP | 38kDa | 细胞核 |
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