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5’ RACE克隆miRNA转录起始位点

作者：广州莱德尔生物科技有限公司 2013-09-26T00:00 (访问量:3948)

5’RLM-RACE利用帽子位点的特征，特性地扩增完整Ⅱ型启动子转录的RNA，确保正真起始位点的获得。pri-miRNA是细胞核内一种瞬时表达的转录本，能够很快被Drosha降解，莱德尔的技术人员经过反复摸索找到提高RACE灵敏度的方法，有效提高了5’ RLM-RACE的成功率。

服务优势：
1、应用“去帽法”原理，可以有效的扩增cDNA5'末端全场序列；
2、采用巢式PCR法，提高了5'RACE的灵敏度和特异性，对低丰度的基因或极少量的RNA样品同样可以进行5'RACE实验；
3、采用扩增法能优越的反转录酶，是长片段的RT-PCR扩增成为可能；
4、一次反应可研究多个基因。

服务流程：
1、根据特定基因，进行序列分析，决定研究方案；
2、抽提总RNA；
3、已知序列验证，根据设计引物扩增，验证参考序列的存在及方向；
4、5'RACE操作；
5、对获取的序列进行测序验证（克隆到载体或PCR产物直接测序）；
6、分析结果，向客户提供完整的实验操作规程、实验报告、测序结果以及测序彩色峰图、引物、质粒以及含有该质粒的菌种等。

客户提供：
新鲜的组织或细胞材料，背景材料：RNA来源、纯度、丰度、所扩增基因的估计长度、种属情况。是否具有同源序列等，已知部分的cDNA序列及方向。插入待检5'段的质粒载体，测序报告以及实验报告。

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