一 Raybiotech 高通量蛋白芯片的概述
1Raybiotech 蛋白芯片
RayBio 人类细胞因子抗体生物芯片是第一款商用蛋白质阵列系统。通过使用RayBiotech系统,科学家可以仅仅在几个小时之内就可以快速、准确有非常便宜的研究和明确多种细胞因子的表达谱。RayBioteh L系列抗体芯片是目前同类产品化抗体芯片中检测指标最多的。这些蛋白包括细胞因子,趋化因子,生长因子,血管生成因子,蛋白酶,可溶性受体和其他细胞培养上清中存在的蛋白以及作为内参的看家基因.许多发表在Nature、Nature Medicine、Cell、PANS、Lancet等世界顶级期刊上的文章中均使raybiotech的产品,对raybiotech的芯片技术和产品的质量给予了肯定。
2 Raybiotech 抗体芯片的基本原理
(1)夹心抗体芯片
夹心抗体芯片是Raybiotech 基于三明治夹心法建立的芯片,它是使用两个抗体的检测模式。它需要一个抗体对即捕获抗体和检测抗体,高品质的抗体对是此方法的关键;捕获抗体固定在固相载体上,将生物样品加入到芯片上一起孵育反应,特异性的抗原与捕获抗体结合,然后加入生物素标记的检测抗体一起孵育,最后通过HRP-链霉亲和素或者化学发光信号、荧光染色剂来检测。夹心法有很高的灵敏度,检测浓度可以低至1-10pg/ml。
(2)标记法芯片
标记法芯片是Raybiotech 的L-系列芯片,L-系列芯片只需要一个捕获蛋白,它用生物素标记样本来替代标记检测抗体。这种模式可以检测那些没有合适的抗体对来建立ELISA检测分析物。因为溶液中没有自由检测抗体与其他抗体相互作用产生干扰试验,基于抗体相互作用产生的交叉反应就可以避免,所以引入新的抗体到标记芯片上比较容易,一个芯片上可以有几百个甚至几千个抗体。标记法抗体芯片适合于大批量的筛选试验,且标记法芯片节省时间和操作步骤。
夹心抗体芯片 | 标记法芯片 |
1 膜式半定量抗体芯片
膜式芯片是Raybiotech的C-系列芯片,C-系列芯片是蛋白质固定在**纤维素或者PVDF膜上,膜的封闭,孵育和清洗都和免疫印记非常相似。膜芯片可以使用化学发光、比色法、 和红外扫描来检测信号,且灵敏度很高,可以检测蛋白浓度低至pg/ml;膜芯片非常容易使用,且适合于大多数生物医学实验,其最大的优点就是甚至不需要任何仪器都可以进行实验操作。
(1)膜式抗体芯片与Western Blotting 的比较
Antibody Arrays(抗体芯片) | Western Blot(免疫印迹) | |
样品量 | 小(1ml 可以检测几十个指标 ) | 大 (粗提液浓缩后需要20-5ul) |
工作强度 | 低 | 高 |
通量 | 多个蛋白(>500) | 单一蛋白 |
动态范围 | 大(10-1000pg) | 小(1-250ng) |
样品种类 | 任何生物液体(包括裂解液) | 仅裂解液 |
成本 | 相对较低 | 高 |
抗体芯片试剂盒 | 膜式抗体芯片试剂盒应用举例 |
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Raybiotech的G-系列抗体芯片,是蛋白质固定在标准大小的薄片上,用一些配件如2,4,16孔的板架、垫圈和搭扣边来形成多通量的芯片。玻片式芯片与膜式芯片相比有几个优点:首先,多个阵列在同一个标准大小玻璃片商,通量大大增加;其次,需要样品量更少,是膜芯片的十分之一;第三,它容易自动化,所以一个技术员一天可以进行几十个芯片检测室没有任何困难的。玻片式芯片制作成本低,价格比膜芯片便宜20%。一般来说,适合于膜芯片的样品都可以用于玻片式芯片。玻片式芯片需要激光扫描仪来检测荧光信号,几乎所有公司各种类型的扫描仪都可以使用。玻片式芯片荧光信号可维持很久甚至几个月,也使用与蛋白浓度的定量分析。
货号 | 货名 | 描述 | 规格 | 样品 | 载体 | 价格 |
AAH-CYT-1 | Raybio human cytokine antibody array 1 | 检测23个人类细胞因子 | 4张膜检测4个样本; 8张膜检测8个样本; |
S、P、M、F、C、T | 膜式半定量 | 3520 |