Ultra克隆让载体和片段:“一见钟情,5min牵手成功”

来源: 南京诺唯赞生物科技股份有限公司   2018-1-25   访问量:9434评论(0)

2017年已结束

这一年里

你一共有299天来了实验室

你喜欢在下午和晚上做实验

你热衷的实验谜雾重重

你习惯默默做实验

却很少输出自己的实验成果... ...

我的实验日记

2017,

实验记录本里用到的较多的词是“载体构建又失败”、“假阳性”、“没长斑”... ...


构建载体没有合适的限制性内切酶,怎么办?

我有4个片段要连接到载体上,一次又一次,杀了我吧?

好不容易连上了,序列连接反了是什么鬼?

构建个载体动辄三四天!啊,让我回家吧!我要回去找**!

8月8日大概是很特别的一天

这一天里

我一共在12块板子上面挑了60个菌斑

无一例外,全是假阳性

12月24日

这一天我睡得很晚

23时30分还守在电泳槽旁

期待今晚是个平安夜

然而那一晚我的胶图上除了marker什么都没有

这一年

我有150天都在构建载体

在所有的实验中

我对这个实验最专一,可就是不成功

时光中的实验室

是不散的宴席

我们错过了你的2017,让你走了那么多弯路,

2018,请让诺唯赞无缝克隆试剂陪伴你!

诺唯赞最新推出的ClonExpress® Ultra One Step Cloning Kit是新一代的重组克隆试剂盒,可用于单个片段和多个片段的重组连接,不受酶切位点限制。

快速 5 - 15 min快速完成重组;

简单 一管式Mix,操作简便;

高效 高效克隆50 bp~10 kb片段,阳性率>95%;

兼容 单片段、多片段、入门克隆三合一;

零背景 提供零背景、Amp+/Kan+双抗性载体。

  • 引物设计

设计带有同源序列的引物。

CE Design:“我是专门设计引物的软件,看我看我看我 ”

  • PCR扩增插入片段

用设计的带有同源序列的引物扩增插入片段,使得最终的目的产物带有和载体末端同源的序列。

Phanta高保真酶:“我是的保真度是taq酶的53倍,选我选我选我”

  • 线性化载体

选择合适的克隆位点,对载体进行线性化

酶切和PCR:“我们都可以喔,任君挑选喔(✿◡‿◡)”

  • 重组反应5-15 min

按比例混合线性化载体和插入片段

载体和插入片段:“一见钟情,5min牵手成功”

  • 转化

将重组产物直接转化后涂平板,挑取克隆进行阳性鉴定

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CE Design:“报告小编,我要给自己加戏,你们知道是引物设计的神嘛,分分钟设计好引物不是梦,一起躁起来。



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