细胞形态异常,鱼骨图来帮忙(四)

来源: 上海逍鹏生物科技有限公司   2019-10-16   访问量:765评论(0)

DuangDuangDuang~

 

BI中国市场部又来给大家送福利啦

我们的鱼骨图分析即将接近尾声啦

大家有没有感觉收获颇丰?


本期我们将继续介绍可能出现问题的部分---培养基

 

如下图所示:


接下来我们将从以下几点进行分析:



血清

不同批号血清内的成分和营养组成比例会不同,因此在实验过程中,需要经过测试来找寻合适的血清批次。当实验需要更换血清时,细胞需要有一段适应期。有些批号适合养神经细胞或间充质干细胞等。

解决方案:

1.建议少量换置,以使用体积1/3,1/2,2/3的方式渐进式置换。
2.提高血清比例增加营养让细胞更快速适应。
3.一次采购足量血清避免经常更换批号。
4.需注意购买血清的真伪,请务必从正规经销商处购买。如遇价格低廉或不明通路(未经冷链全程运送)都需提高警惕。


基础培养基

基础培养基以形态可分为干粉培养基和液态培养基。
干粉培养基:自行配置时,需要注意是否需另外添加营养物或必须物至培养基中(如:碳酸氢钠)并调整pH值。
液态培养基:使用不适合的培养基培养细胞,细胞仍可生长但特性会改变。培养基中常用的酚红(pH指示剂)本身有微弱雌激素作用,会刺激具有雌激素受器的细胞生长。
解决方案:
BI提供不同细胞专用无血清培养基,各式基础培养基。(详情请戳此处




添加因子

在临床及科学研究实验中,常需外加生长因子活化细胞或促进分化,建议最好选购不含动物或人衍生物质的高活性,高纯度重组蛋白,以确保产品活性符合严格规范。

常见使用的添加因子如:细胞因子(Cytokine),这是一类小分子蛋白质或多肽类,这些因子可以帮助细胞生长,促进细胞活化,直接参与免疫调节作用和其他细胞因子的形成,也是细胞与细胞之间讯息传递的重要桥梁。在正常生理状况下细胞受到刺激后也会自然分泌因子,不同种类的细胞因子也会具有不同的免疫功能,然而过度的细胞因子分泌也可能会引发炎症反应,可直接、间接诱导或抑制细胞凋亡。

一些动物来源,组分复杂的添加剂,如动物源的基底质,批间差比全合成或单一组分试剂大,使用时必须小心注意。

解决方案:

逍鹏生物提供科研及cGMP级别细胞因子、小分子化合物等。


光照

避免紫外线照射培养基,以防培养基中的HEPES、核黄素及色氨酸形成过氧化氢自由基,对细胞造成毒害作用。

解决方案:
如需长时间观察细胞,如Live cell imaging,可选用CELL Guidance Systems:LiveLightTM光稳定培养基系列:
1.MEMO培养基(取代DMEM),Cat No.:M06-100/M06-500
2.NEUMO培养基(取代Neurobasal),Cat No.:M07-100/M07-500
3.SOS补充剂(取代B-27),Cat No.:M09-20/M09-50



谷氨酰胺

不同的细胞培养,培养基中都需加入一定量的谷氨酰胺,作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和核酸代谢。谷氨酰胺缺乏会导致细胞生长不良甚至死亡。谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解,谷氨酰胺的降解会导致氨的形成,而氨对于一些细胞具有毒性。加有谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存两周以上时,应重新加入谷氨酰胺,或可直接选用添加长效型谷氨酰胺的培养基。

解决方案:

1. BI可提供: 

名称            货号           

L-Glutamine Solution, 29.2mg/ml in Saline (200 millimole/liter)

谷氨酰胺溶液

03-020-1

L-Alanyl-L-Glutamine (Stable Glutamine), 200 mM per liter

谷氨酰胺溶液(长效型)

03-022-1


2. 提供各式细胞培养辅助试剂。(
点我

 

来自以色列Israel的新年祝福(BI过年喽)!




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