细胞形态异常,鱼骨图来帮忙(三)

来源: 上海逍鹏生物科技有限公司   2019-11-15   访问量:779评论(0)

滴滴滴~BI中国市场部又来送福利啦

分析完内源外源污染状况

还是没有找到原因?

 

 那么我们继续分析

 


 

 

根据鱼骨图鱼刺大小所代表的问题发生概率大小,接下来我们来谈谈实验操作过程中,有哪些因素会影响到我们的实验结果呢。

 

 

操作过程

 

 操作过程又可细分为以下几类:

 

 

接下来我们将逐条进行分析↘

 

操作人员

 人体皮肤表面平均带有103~106/cm2的微生物,污染物可能由于操作人员及穿着衣物带入。进出细胞房需穿着合适的实验衣及更换专用的拖鞋,尽量降低粉尘、皮屑及附带之微生物的扬起及掉落,以免造成污染。

解决方案:

人体是细菌最大的携带者,进出细胞房应该这么做:

1.换专用实验衣:勤更衣,无菌无尘衣穿过六小时后,已可在每平方公分中采集到1-6个微生物。

2.戴口罩:减少讲话,因为口水中含107个微生物/ml,并且寄居在人体部分的支原体也会随之影响实验环境所以应戴口罩操作。

3.戴手套:进入细胞房之前,应去除身上配戴所有与实验无关的随身物品,洗手,消毒,戴上手套,再使用75%酒精消毒。

 细胞房出入口

 无净化的室内空气可检测到浮游菌500~2000颗/cm3

 

 

2015药典指导原则《9205药品洁净实验室微生物监测和控制指导原则》中,有规定不同洁净等级实验室的浮游菌和沉降菌数量要求。

解决方案:

1.按要求细胞房应为封闭、正压、洁净房间(1-10万级洁净度)。如受限于现况,可考虑医疗用移动式空气净化机,以净化空气。

2.如担心污染物外泄,细胞房还应设计为相对负压。

3.人员进出细胞房应有管制,经过培训才能进入操作,避免污染别人。

4.细胞房窗户不建议打开!打开窗户,许多细菌会乘机夹杂在空气中进入细胞房里。

★细胞房内绝对不可穿拖鞋或凉鞋,以避免带入脚气霉菌。应该穿全包裹式鞋套或专用鞋子

 生物安全柜

 生物安全柜需尽量保持清洁及净空,非必要性的物品不要放在里面,容易扰乱操作柜内气流。使用前一定要使用消毒杀菌溶液进行擦拭[如75%酒精或Pharmacidal(不需擦拭,自然风干)],实验过程中,若出现液体飞溅的情况,应当马上用消毒剂擦拭;使用后需要进行消毒并且UV处理20分钟以上。生物安全柜与超净工作台的高效滤网(HEPA filter)滋生细菌后反而容易成为污染源,良好的操作环境,才能确保细胞的健康。

解决方案:

1.Biological Industries (BI)可提供:


2.定期更换生物安全柜与超净工作台HEPA滤网,检测风速与测漏。

3.开始实验前,必须对超净台进行全面消毒,整个机柜表面进行擦拭,使用前先打开安全柜通风系统,流通空气,直到原有的内部浊气都被排出。

4.实验过程使用明火容易导致生物安全柜气流紊乱,非必要时应该尽量避免。

显微镜置物台

 显微镜频繁地与不同细胞系接触,使显微镜也成了污染的高发地;使用显微镜观察细胞时,放置细胞培养皿或是培养瓶的载物平台与桌面,使用前后需要进行消毒,并保持干净,以免造成交叉污染。

解决方案:

Biological Industries (BI)可提供:

 

 


 

 

 二氧化碳培养箱

 培养箱内的CO2、湿度和温度都需要定期校准,避免对细胞提供过低或过高的二氧化碳浓度和不当的湿度与温度;培养箱的环境非常适合微生物生长,所以水盘使用的水需灭菌并加入抑菌剂,且定期清洁擦拭培养箱体腔与不锈钢架,杜绝微生物滋生。

解决方案:

1.Biological Industries (BI)可提供:


2.选购可灭菌的二氧化碳培养箱,定期灭菌消毒。

3.避免将培养箱直接置于地面上,需要使用支架或置于实验桌上。如果培养箱直接放在地面上,每次打开门时产生的空气流动,会增加污垢、灰尘和污染物进入培养箱的机率。

4.培养箱的开门时间能短则短,开门次数越少越好,减少空气传播的污染物流入。

5.应避免在培养箱中有震动或是周围有离心设备,尤其细胞刚传代或是复苏时,如受到震荡摇晃会造成贴壁迟缓,甚至会有聚集成团的状况。

水浴锅

 水浴锅常年潮湿,是细胞房中较容易滋生细菌及真菌的设备,需要定时清洁;污染源容易在细胞复苏、培养基或无菌试剂回温的过程中,粘附瓶身水滴并带入超净工作台中。

解决方案:

1.定期消毒更换水,水浴锅中应使用无菌超纯水,并加入抑菌剂。

Biological Industries (BI)可提供:

2.水浴回温时,必须确保容器的瓶盖不与水接触;因为污染源可能会在此时通过瓶盖的缝隙顺势留在瓶口。
3.水浴回温后必须确保容器表面擦干,75%酒精消毒后再放进生物安全柜。

4.水浴锅使用结束后,要记得将水浴锅盖子盖上,避免空气灰尘落入。

灭菌锅

 灭菌锅及相关设备,都需要定时保养与校准以维持其正常性能,避免灭菌效果不达标。

解决方案:

定期做BD(Bowie Dick)测试,确保压力、温度与时间均符合灭菌要求。

离心机

 离心机是细胞实验最常使用仪器, 离心机内部的小缝隙也是藏污纳垢之处,容易发生交叉污染的重灾区,会发生污染的重点怀疑对象。

解决方案:

定期清洁离心机内部的转子和腔室。

Biological Industries (BI)可提供:

 

BI 中国市场部

 好啦,本期介绍也就到这里啦,还没看过瘾的小伙伴记得每周关注公众号动态噢~


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