JM110感受态细胞

保存条件：-80℃。

1.产品简介：

本产品是采用大肠杆菌JM110菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，甲基化基因dam,dcm缺失菌株，只适用于质粒的转化，一般不用于质粒构建。

基因型：rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F’[traD36 proAB lacIqlacZΔM15]

特点：1．JM110 菌株具有硫酸链霉素抗性(StrR)；是甲基化基因dam、dcm缺失的菌株，提取得到的质粒DNA，可被对dam、dcm甲基化敏感的内切酶切割。2．lacIqlacZΔM15的存在使JM110可以进行蓝白斑筛选，但转化效率不高。一般不用于质粒构建，只适用于质粒转化。pUC19质粒检测，转化效率可达107 cfu/μgDNA。

2.使用说明：

1．取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30min。

3．42℃热击45sec，然后快速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min，该过程不要摇动离心管。

4．每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床， 150 rpm振荡培养45～60min使菌体复苏。

5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养， 37℃培养12~16h。

3.注意事项：

1．刚化冻的细胞转化效率最高，避免反复化冻。

2．整个动作要轻柔。

*本试剂仅供实验室研究使用